层粘连蛋白包被培养皿怎么做？

sunny218

大家好，现在在学习做大鼠生精干细胞的分离纯化，想请教一下层粘连蛋白包被培养皿怎么做？谢谢！！

xiangxiaoliang

我是用一下方法效果还可以。& S) K# U8 O( ?7 E
Laminin stock solution (1 mg/mL) (Sigma)
' t# O! w$ G1 e8 YStore stock solution in 0.1-mL aliquots at −20°C. Just before use, prepare a 1:50 dilution by diluting 0.1 mL of stock solution in 5 mL of sterile 1X PBS supplemented with Ca2+ and Mg2+
; Y; r! _, A$ K(Sigma D8662).
5 U! q  O1 f' B" V6 j

wangshan

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2 m, s5 n# u0 j' s哦哦，laminin的浓度我不是很清楚呢，我用的是fibronectin，可以查一下产品说明书或者相关paper吧。

sunny218

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* c, J% t0 R3 T, ^' [. M' Z: P9 R* M4 r: O
谢谢你的回复哦！！

sunny218

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# s% u6 f# t' s; k# ]9 R! h3 I- |3 F# K0 [; F: R' U4 W9 r6 X4 r6 S
您好，谢谢您的回复！想问一下laminin的也是用PBS稀释？浓度是多少啊？

rainnyshine

楼上说的是fibronectin，楼主问的是laminin，不过使用方法都差不多的

wangshan

我使用的是sigma的fibronectin，使用PBS将其稀释到5 ug/ml，然后加入孔板中，使其覆盖整个皿底，室温下孵育1小时之后，吸出fibronectin溶液（可回收）。可以用PBS轻柔的洗一遍，然后在工作安全柜中风机吹干待用。