层粘连蛋白包被培养皿怎么做？

sunny218

大家好，现在在学习做大鼠生精干细胞的分离纯化，想请教一下层粘连蛋白包被培养皿怎么做？谢谢！！

wangshan

我使用的是sigma的fibronectin，使用PBS将其稀释到5 ug/ml，然后加入孔板中，使其覆盖整个皿底，室温下孵育1小时之后，吸出fibronectin溶液（可回收）。可以用PBS轻柔的洗一遍，然后在工作安全柜中风机吹干待用。

rainnyshine

楼上说的是fibronectin，楼主问的是laminin，不过使用方法都差不多的

sunny218

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. S4 x2 Q' |* j/ y  \% k# O6 G7 F0 I/ L! i3 ?# Y* i. _6 P) o) h0 |
您好，谢谢您的回复！想问一下laminin的也是用PBS稀释？浓度是多少啊？

sunny218

回复 wangshan 的帖子# H9 @# h( T+ ]1 p) l  a8 w2 C

5 F8 r* k1 z) u# @, u谢谢你的回复哦！！

wangshan

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4 B5 O* ?; P1 |! }
2 `) E/ @% S9 l8 O% G0 v# p哦哦，laminin的浓度我不是很清楚呢，我用的是fibronectin，可以查一下产品说明书或者相关paper吧。

xiangxiaoliang

我是用一下方法效果还可以。
$ R. o% G. r! l( e8 h- GLaminin stock solution (1 mg/mL) (Sigma)
8 m: }7 I, r- fStore stock solution in 0.1-mL aliquots at −20°C. Just before use, prepare a 1:50 dilution by diluting 0.1 mL of stock solution in 5 mL of sterile 1X PBS supplemented with Ca2+ and Mg2+. @4 n1 f3 @  A: E% N) o' }
(Sigma D8662).
/ P+ R  K6 u  b8 m