层粘连蛋白包被培养皿怎么做？

sunny218

大家好，现在在学习做大鼠生精干细胞的分离纯化，想请教一下层粘连蛋白包被培养皿怎么做？谢谢！！

wangshan

我使用的是sigma的fibronectin，使用PBS将其稀释到5 ug/ml，然后加入孔板中，使其覆盖整个皿底，室温下孵育1小时之后，吸出fibronectin溶液（可回收）。可以用PBS轻柔的洗一遍，然后在工作安全柜中风机吹干待用。

rainnyshine

楼上说的是fibronectin，楼主问的是laminin，不过使用方法都差不多的

sunny218

回复 rainnyshine 的帖子, B* ?; M& o# a6 q! d/ @+ D

2 x; h# }; d6 M4 r您好，谢谢您的回复！想问一下laminin的也是用PBS稀释？浓度是多少啊？

sunny218

回复 wangshan 的帖子
" ?' x; G; x1 u5 l+ r$ k, n* n4 i: _' Q, v' V, U# M% q
谢谢你的回复哦！！

wangshan

回复 sunny218 的帖子: \! o/ J1 j" k* U( Y7 F

3 i- U' p( T! S' e# }. F4 i哦哦，laminin的浓度我不是很清楚呢，我用的是fibronectin，可以查一下产品说明书或者相关paper吧。

xiangxiaoliang

我是用一下方法效果还可以。: Q" Q  |1 H& A1 A8 H0 w4 x+ R' v
Laminin stock solution (1 mg/mL) (Sigma)" y1 X  s' ]8 K" h# C* G5 N
Store stock solution in 0.1-mL aliquots at −20°C. Just before use, prepare a 1:50 dilution by diluting 0.1 mL of stock solution in 5 mL of sterile 1X PBS supplemented with Ca2+ and Mg2+8 ?) e( ]7 o/ ]/ A% @* q( b
(Sigma D8662).
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