层粘连蛋白包被培养皿怎么做？

sunny218

大家好，现在在学习做大鼠生精干细胞的分离纯化，想请教一下层粘连蛋白包被培养皿怎么做？谢谢！！

wangshan

我使用的是sigma的fibronectin，使用PBS将其稀释到5 ug/ml，然后加入孔板中，使其覆盖整个皿底，室温下孵育1小时之后，吸出fibronectin溶液（可回收）。可以用PBS轻柔的洗一遍，然后在工作安全柜中风机吹干待用。

rainnyshine

楼上说的是fibronectin，楼主问的是laminin，不过使用方法都差不多的

sunny218

回复 rainnyshine 的帖子- w% N. T, e9 t" n; J- l
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您好，谢谢您的回复！想问一下laminin的也是用PBS稀释？浓度是多少啊？

sunny218

回复 wangshan 的帖子6 ]' ?# h3 C* S3 o

$ W2 n& f; r) V& R" x+ r谢谢你的回复哦！！

wangshan

回复 sunny218 的帖子% I0 k8 i( A: \
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哦哦，laminin的浓度我不是很清楚呢，我用的是fibronectin，可以查一下产品说明书或者相关paper吧。

xiangxiaoliang

我是用一下方法效果还可以。* O! V* ~& g) G5 g& n% x" U
Laminin stock solution (1 mg/mL) (Sigma)
* f% c" ]  x( T, {Store stock solution in 0.1-mL aliquots at −20°C. Just before use, prepare a 1:50 dilution by diluting 0.1 mL of stock solution in 5 mL of sterile 1X PBS supplemented with Ca2+ and Mg2+
: Y8 @% h$ J. T( f5 M9 A2 {9 E(Sigma D8662). 3 W' r8 j* R. q