层粘连蛋白包被培养皿怎么做？

sunny218

大家好，现在在学习做大鼠生精干细胞的分离纯化，想请教一下层粘连蛋白包被培养皿怎么做？谢谢！！

wangshan

我使用的是sigma的fibronectin，使用PBS将其稀释到5 ug/ml，然后加入孔板中，使其覆盖整个皿底，室温下孵育1小时之后，吸出fibronectin溶液（可回收）。可以用PBS轻柔的洗一遍，然后在工作安全柜中风机吹干待用。

rainnyshine

楼上说的是fibronectin，楼主问的是laminin，不过使用方法都差不多的

sunny218

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2 p& [% n% H4 v1 v( z
: T, q' |# k$ ^8 O您好，谢谢您的回复！想问一下laminin的也是用PBS稀释？浓度是多少啊？

sunny218

回复 wangshan 的帖子5 f# z+ T& h8 Y$ Y6 x4 ?

! d+ P. \+ Z0 m谢谢你的回复哦！！

wangshan

回复 sunny218 的帖子5 h! X4 ?6 b6 G$ P7 v* r

) n- G; a6 y& n) C哦哦，laminin的浓度我不是很清楚呢，我用的是fibronectin，可以查一下产品说明书或者相关paper吧。

xiangxiaoliang

我是用一下方法效果还可以。5 K! w; N& k* c$ P& N
Laminin stock solution (1 mg/mL) (Sigma); c5 i+ ^, G) `! }* @# a: W
Store stock solution in 0.1-mL aliquots at −20°C. Just before use, prepare a 1:50 dilution by diluting 0.1 mL of stock solution in 5 mL of sterile 1X PBS supplemented with Ca2+ and Mg2++ M) }' o: |7 s- K9 Q9 v2 w
(Sigma D8662). $ ?8 U( V2 v5 i8 M9 {* Z  {