大鼠MSC的消化和计数

倒腾细胞

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& d/ r. w7 `  T! K& D- O" Y
3 d4 ^  X7 f$ C/ {4 o前辈，稀释之后胰酶浓度会不会太低呢？如果1ml太少那么为什么没有考虑像我们这样加3ml呢？是因为顾及到EDTA对细胞有损伤吗？

wuzhongqi

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! M, F6 {( E: ]) {( l
; l4 ^' z. b$ c一方面1ml酶在75的瓶中太少，不容易完全接触细胞，另一方面稀释过后避免没直接作用于细胞

屋檐上的乌鸦

倒腾细胞 发表于 2014-7-3 20:30
9 K0 B9 b; Y/ c回复 wuzhongqi 的帖子
. m  N4 o5 {( `$ f' Z+ K
) E7 R% t/ Y( M前辈为什么要稀释胰酶呢？我们的酶和浓度就是按照文献来的~

9 s' U$ p5 l% P2 ^稀释完的效果和没稀释的效果差不多的！我也用过

屋檐上的乌鸦

wuzhongqi 发表于 2014-7-2 17:18 5 N; @" ^' E2 N
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+ b( M8 I- n. g; q0 I# @+ a  `+ q7 G5 J" k, q8 x) S' \
75的瓶我一般加1ml胰酶和1ml生理盐水

- ~/ J- J5 O+ e+ v
你是稀释胰酶大的浓度的吧。

wuzhongqi

我们用的是0.25%的EDTA     加1倍生理盐水稀释

倒腾细胞

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5 C2 d3 z& i$ d: R/ P1 D) _8 z; J7 u( D9 b/ D
前辈为什么要稀释胰酶呢？我们的酶和浓度就是按照文献来的~

wuzhongqi

1:1加的   主要是稀释胰酶

倒腾细胞

回复 wuzhongqi 的帖子5 `2 ^1 v) Z1 P* f$ }
# I2 \& i8 R2 n
哦？还有生理盐水？这有什么讲究吗？

wuzhongqi

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* ~1 u$ l  W; }7 n# T: z) H9 N  B7 s
75的瓶我一般加1ml胰酶和1ml生理盐水

屋檐上的乌鸦

我一般用2ml左右，消化2min就可以都消化下来了