鼠尾尖成纤维细胞的提取和培养

mecol

哪位大侠做过鼠（大鼠或者小鼠）尾尖成纤维细胞的提取和培养，想请教一下：* Y+ Q3 j' h1 |- z6 Z( {# h0 d* p
1.尾尖的提取长度最少是多少啊？
2 ]) O+ {' o2 H2.不论是大鼠，还是小鼠，当我们剪取的时候，会发现有皮肤层的，还有内部的待成骨的胶原层，请问该选取前者还是后者呢？

mecol

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2 E. t1 R1 C+ s% U3 T; e7 n% I8 ~' k0 d5 h' m! a
好的，谢谢！

kasaya

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4 n$ G' R; @; O" e5 Y, J% U
7 i  S6 {& J1 _长度1-2mm可能太少了，我觉得小鼠的话最少5mm。大鼠应该也差不多。

mecol

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& V0 M0 x& s9 r& j
$ k! p: O+ C& T/ U+ O非常感谢你的解答。不好意思，前面说的不准确，应该是皮肤层和软骨层。如果是养皮肤成纤维细胞的话，应该舍弃软骨层的吧？另外，长度1-2mm够吗？

kasaya

如果是mouse的话，剪0.5-1cm就足够了。Rat的话也差不多，可以稍微剪长0.5cm。, }$ g# F: I4 {5 }
剪下来后，把断端皮肤剪个小口，将皮肤层基层和尾椎骨（如果有的话）分开，均剪碎（越碎越好），平铺在皿底，用FBS覆盖固定，皮肤应为皮下组织和肌肉面（楼上所说的成骨胶原层是指骨膜吗？如果是应该适合椎骨连在一起的）贴皿底。如果我理解的不对的话，可以在下图指出您说的是哪一层吗？