293t细胞形态异常，是支原体污染吗？

LuXK

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最近养的293T细胞形态出现异常，在正常细胞中会出现变圆的细胞，一块一块的，慢慢的就会脱落死亡。有些形态看上去挺正常的，但是包病毒后细胞慢慢就死了，见图。有没有战友遇到过类似的问题？是支原体污染吗？- n+ E. E/ Q5 i$ K& [2 p

cao8194595

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在出现上述情况的时候培养液颜色有改变吗，会不会变黄，在高倍镜下看是不是有会快速移动的东西？不一定是你们的问题，如果是支原体污染可能在冻存的时候就会发生，如果仅仅出现在你们实验室的话可能是血清的问题。如果生长不缓慢只是空泡化并脱落的话也可能是黑胶虫污染，或者是病毒感染，因为空泡化是细胞病变的一个主要特征。

LuXK

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“细胞不转质粒还行，转完质粒就变圆，贴壁也不好。”这种情况确实有，那我先换细胞用用试试，谢谢你的建议。

wwy551

回复 LuXK 的帖子" Y* m0 a* m  \( ?9 ?2 q' k0 ^

7 |3 G% K5 _) v1 h3 ?应该是。我之前碰到过相同情况，细胞不转质粒还行，转完质粒就变圆，贴壁也不好。我当时用的293T也是从别人那里来的，自己刚开始用了几代包病毒也还行。
% F7 g, m, d/ i- j别人用没事儿，甚至到了你自己手里用几代没事儿，不说明任何问题，你根本不知道293T已经养了多少代了，虽说是建系的，但是用时间久了，状态不好很正常。碰到这种情况，别纠结了，直接换细胞。

184lj

取细胞培养上清液跑个PCR检测一下就可以了。

LuXK

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7 h/ A  n3 S0 F5 Z' @8 V% t8 A7 v) k' t3 V) ]
应该不是细菌或真菌污染，培养基中很干净，而且也不会很快变黄。

LuXK

回复 wwy551 的帖子+ }. o; |8 d9 X/ d3 {- X* k
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应该不是，从别人那里要的细胞，他们的养的没问题

LuXK

回复 get0715 的帖子0 \+ T- v: `/ K8 `* N: c

+ Y, f  y2 z* }! B嗯，谢谢

LuXK

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不是细菌污染，培养基很干净

yuanyan2010

感觉是细菌或者真菌污染。支原体污染是肉眼不可见的。