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[请教] 293t细胞形态异常,是支原体污染吗?   [复制链接]

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发表于 2014-7-16 10:42 |只看该作者 |正序浏览 |打印
本帖最后由 LuXK 于 2014-7-16 10:55 编辑
3 C9 J  A0 p# M7 |+ t: V0 X2 k2 U- G* W% P
最近养的293T细胞形态出现异常,在正常细胞中会出现变圆的细胞,一块一块的,慢慢的就会脱落死亡。有些形态看上去挺正常的,但是包病毒后细胞慢慢就死了,见图。有没有战友遇到过类似的问题?是支原体污染吗?- n+ E. E/ Q5 i$ K& [2 p

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包病毒后1

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发表于 2014-7-17 16:49 |只看该作者
回复 LuXK 的帖子
' q! H! Y; e& p& K" z8 K: H' q3 I3 I1 p+ W! G' X7 S
在出现上述情况的时候培养液颜色有改变吗,会不会变黄,在高倍镜下看是不是有会快速移动的东西?不一定是你们的问题,如果是支原体污染可能在冻存的时候就会发生,如果仅仅出现在你们实验室的话可能是血清的问题。如果生长不缓慢只是空泡化并脱落的话也可能是黑胶虫污染,或者是病毒感染,因为空泡化是细胞病变的一个主要特征。
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发表于 2014-7-17 11:13 |只看该作者
回复 wwy551 的帖子
) y  }* U. \; y0 o' `2 M  L1 h3 ~: v+ S$ Y& p. Q. K% j: R" g
“细胞不转质粒还行,转完质粒就变圆,贴壁也不好。”这种情况确实有,那我先换细胞用用试试,谢谢你的建议。

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发表于 2014-7-17 10:48 |只看该作者
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回复 LuXK 的帖子" Y* m0 a* m  \( ?9 ?2 q' k0 ^

7 |3 G% K5 _) v1 h3 ?应该是。我之前碰到过相同情况,细胞不转质粒还行,转完质粒就变圆,贴壁也不好。我当时用的293T也是从别人那里来的,自己刚开始用了几代包病毒也还行。
% F7 g, m, d/ i- j别人用没事儿,甚至到了你自己手里用几代没事儿,不说明任何问题,你根本不知道293T已经养了多少代了,虽说是建系的,但是用时间久了,状态不好很正常。碰到这种情况,别纠结了,直接换细胞。
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发表于 2014-7-17 10:04 |只看该作者
取细胞培养上清液跑个PCR检测一下就可以了。
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发表于 2014-7-17 08:41 |只看该作者
回复 yuanyan2010 的帖子
7 h/ A  n3 S0 F5 Z' @8 V% t8 A7 v) k' t3 V) ]
应该不是细菌或真菌污染,培养基中很干净,而且也不会很快变黄。

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发表于 2014-7-17 08:40 |只看该作者
回复 wwy551 的帖子+ }. o; |8 d9 X/ d3 {- X* k
. B- N) t1 V9 I
应该不是,从别人那里要的细胞,他们的养的没问题

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发表于 2014-7-17 08:38 |只看该作者
回复 get0715 的帖子0 \+ T- v: `/ K8 `* N: c

+ Y, f  y2 z* }! B嗯,谢谢

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发表于 2014-7-17 08:38 |只看该作者
回复 Jonathan 的帖子
% l0 |) L0 P. j  x# I; W6 ?8 r3 ^/ q" }4 I. L; V$ t/ O: K1 j! e
不是细菌污染,培养基很干净

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发表于 2014-7-16 19:23 |只看该作者
感觉是细菌或者真菌污染。支原体污染是肉眼不可见的。
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