淋巴细胞分离液分离白膜层

筱筠

请教各位，做CIK细胞培养的时候第一天用淋巴细胞分离液分离白膜层有脂肪粒是什么原因，最近每一个患者都是这样的情况。使用的试剂都没有改变

thor0504

回复 筱筠 的帖子5 L7 w' J% g9 h" Y; r( _: L1 N+ u0 m

+ `7 s' q- w  Z$ t, d' E之前有没有出现过类似情况？细胞是用的单采还是全血？如果全血的话有没有分离血浆，患者抽血前有没有注意饮食？

筱筠

回复 thor0504 的帖子0 Y" U+ V" [3 T

; j, |; f$ Z& l以前也出现过，但是极少数的。细胞是全血，进行了血浆分离。患者抽血都是空腹的

thor0504

回复 筱筠 的帖子) G& h: H; ~1 e9 f: i" i+ S% v5 a; y

9 ]2 A  @5 b; H" `; d$ Z问下病人的脂肪量怎么样，有没有脂肪肝或者血脂偏高的情况，如果有的话就不奇怪了。

aochongyu

' c* w- I; M* l. h' y: U0 |7 b1 z

4 @3 N: N- F9 `5 Q+ m6 @% g  j0 T2 k) e3 n估计就是吃饭了或者脂肪过多吧，我们也碰见过，没有影响下边的培养啊，细胞长得也不错，数量也行啊。

gondobar

我们前几年也遇到过，有两种情况，一是患者本身血液脂肪含量，尽量让患者采血前几天控制饮食；二是离心机出问题了，速度不够，或者后期减速问题，还离心机立刻解决！

xufeng8686

回复 筱筠 的帖子9 G3 K' b3 k6 P8 ^# F2 _$ P6 ]$ M) v

7 }) k/ N1 W# o# P5 z* E' x分离完血浆后，有没有加入PBS混匀。你可以再吸取细胞层的时候，注意些，尽量只吸细胞层。我们以前做的时候，有些病人，吃过饭抽血后，分理出的血清就是乳状的，这和病人有很大关系。个人意见，希望对你有点帮助。

hwlightning

这些对细胞培养没有影响，可以继续根据SOP培养。

筱筠

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, [5 D- ?$ j$ g$ O8 s" f% e需要检测离心机吗？我们目前也没有那个条件啊！提高离心速度？提高多少啊？我现在是800G，15min

gondobar

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0 x8 r' ?4 ^! a# A8 Y4 V) j- ?- t1 y6 f5 C
尽量检测一下离心机吧，分离可以900G。