培养脐带干细胞没有成功，恳请各位老师指教，谢谢您！！

yongganyixie

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你中间换液的时候，倒掉的培养液粘稠吗？我们一般这样养的话，两周左右就出细胞了

cloud100

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' i3 o5 ~6 E$ ~) k嗯，其实我后面做的这一批，的组织块贴壁蛮好的，我也很少移动培养瓶，不过就是没有长出来。组织块有大有小，应该也不存在体积过大或过小问题，实在不明白为什么，打算尝试酶消化法了。

lovesxj941

可以试试用培养皿来养。好接种，然后加一点点培养基培养。就是刚沫过培养皿底，但是还没沫过组织块。这样就避免了组织块缺失营养。" e) |( X% f4 s* @5 T6 [9 t
皿也可以贴多一些。就算漂起来一部分，其他的也能养起来。

水念人倦

回复 cloud100 的帖子' I4 ^, ~1 H  P7 `6 T

2 f  S+ ~7 [! b: W是的。劳动力不足，我们正准备尝试。不过有点小贵

cloud100

回复 水念人倦 的帖子% x* P: M; I, @% _4 f
, y6 r; x3 [$ l! y5 a  o
这篇文献写的是酶消化法哦。。。

cloud100

回复 yongganyixie 的帖子
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" z: w+ e$ s7 L$ q& j! [$ x  D我就是这么做的，今天已经是第20天了，5个培养瓶都没有细胞，而且感觉培养液颜色变化也越来越慢了，真的不知道哪里有问题，都打算用酶消化法了。。。

水念人倦

( u! @6 G, ~( h# t" k; K2 e# H9 v4 O: d4 \4 T2 Q3 m
手法差不多啊，唯一区别我们用的是αMEM，不过按说区别不大啊，推荐个文章可以看看。

yongganyixie

我们一般是取回脐带，冲洗干净后，剪成3cm左右的小段，再沿静脉管剪开，剔除静脉，动脉，再撕华通氏胶，再剪碎，洗涤，然后加少量培养液直接贴壁培养，第二天补液，中间再隔几天换液，细胞就慢慢爬出来了

cloud100

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恩，好的，谢谢您！！

听不到

感觉没有什么大问题，我做的和你不一样的应该就是于培养液里剪碎，铺到瓶里之后倒置于培养箱过夜，再正置加少量培养液，然后隔天换液基本就贴壁了，快的10天能长，慢的基本两周也长出来了。不过我之前也整过每天看，然后2周了都没长，舍不得扔，就没动，一直到20天左右的时候看爬出来很多，所以我觉得关键还是静置，别老动它