精原干细胞建系交流--发现培养液变黄，细胞逐渐死亡 - 生殖干细胞专区干细胞之家

干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 › 干细胞之家论坛 › 干细胞实验室技术交流 › 生殖干细胞专区 › 精原干细胞建系交流--发现培养液变黄，细胞逐渐死亡



免疫细胞治疗专区	欢迎关注干细胞微信公众号

返回列表

查看: 68378\|回复: 4	go 精原干细胞建系交流--发现培养液变黄，细胞逐渐死亡 [复制链接]

w343989328

高级会员

Rank: 4

积分: 1013
威望: 1013
包包: 2639

金话筒优秀会员

楼主

发表于 2014-8-13 13:03 |显示全部帖子

feeder状态呢？支原体？

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 1	+ 5	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1 包包 + 5 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

w343989328

高级会员

Rank: 4

积分: 1013
威望: 1013
包包: 2639

金话筒优秀会员

沙发

发表于 2014-8-13 17:38 |显示全部帖子

很难避免的，我们也只能这样做：SPF级拿出后迅速开始实验，不要在外面晾太久；杀死小鼠后，酒精浸泡数次；解剖小鼠的时候，手术器械分开用，碰到皮毛的就不要碰内脏；建系后，取上清检测支原体，当然feeder也要事先检测；如果污染，有一些药物可以杀的，但效果似乎不是特别好。你如果只传到P3，我的建议是重新分离。

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 10	+ 20	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10 包包 + 20 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

w343989328

高级会员

Rank: 4

积分: 1013
威望: 1013
包包: 2639

金话筒优秀会员

藤椅

发表于 2014-8-14 14:43 |显示全部帖子

支原体主要两个来源，一个是血清，一个是动物本身，即使是SPF级也很难避免。我们之前分离耳朵的纤维细胞一直出现支原体，SSCs还好，所以我猜，你可能在分离细胞过程中被支原体污染了。支原体一般不会直接导致细胞死亡，只是和细胞争夺养分，导致细胞状态逐渐变差，是一个比较慢性的过程。而且，细胞培养基迅速变黄，是支原体污染一个特征。