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楼主
发表于 2014-8-29 13:44 |显示全部帖子
根据个人的经验,我没有用酒精泡的这一过程,当然我也觉得这个可能跟最终失败结果没什么关系。' k2 l/ U# W9 s" ]2 k
根据你的描述,只有3-4块贴壁,那样肯定细胞量极少,我觉得很有可能是你一开始加的培养基太多了。1 G* ~: B8 t% t+ U
在一下步骤你可以重点注意一下:
1 [6 a0 L' h% B  w! O: _1.块不要剪的太小,虽然各文献中的体积都比较小,但是我个人做的话用枪头直接吸都是有点费劲的,甚至有时候需要剪一下枪头;
( |6 r. x5 J! d& N: H! f2.培养基一开始不要加太多,刚刚可以润湿平底薄薄一层就可以,然后将组织块打进去,每瓶的量可以多一些;4 E% W  S( @9 `% A$ e; B0 T7 ^
3.另外我看了你的描述,好像没有倒置培养这一过程,一般我接到瓶子后直接倒着放箱子里养一夜,第二天观察一下再补液(因为之前说的,接种的时候培养基加的非常少)
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