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各位老师,求人脐带间充质干细胞   [复制链接]

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楼主
发表于 2014-8-29 15:28 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
    小女子取人脐带间充质干细胞原代已经有两个月了,取了多次,只有第一次从组织块里爬出细胞,但是细胞状态不好,经过两次传代,细胞就不贴壁了。在剩下的时间里,不管怎样,没有一块组织块有细胞爬出(这让我非常奇怪)。我将取来的脐带放在50ml离心管内,里面盛35mlDMEM/LG,放到碎冰中,拿回实验室(实验室里医院只有50米)。实验中用含有1%双抗的PBS冲洗脐带中的淤血,剖除脐带中的三条血管,然后皿中加入约1.5ml培养液(DMEM/LG+10%FBS+1%双抗)将脐带剪碎,铺皿。第二天再向皿中各加入3-4ml培养液。实验全程都在冰袋上进行,时间约为1.5小时。我就是不明白为什么就是没有细胞,哪怕有一块组织块有细胞爬出。: X- `+ w% Y. d7 V
    时间紧迫,细胞还是没有眉目,实验无法进行,再此有哪位大神有多余细胞能借我或与我交换,让我的实验能初步进行,顺利毕业!当然,帮指出我的错误之处,同样不胜感激!先谢谢各位啦~
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沙发
发表于 2014-8-29 15:35 |显示全部帖子
只好自己顶了

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藤椅
发表于 2014-8-29 16:06 |显示全部帖子
回复 荷荷 的帖子
& L" ?  ~& x( r4 @  x
4 r: t' U5 \, X( f2 {9 Y之前我就是直接加培养液,这是刚改的方法,但是都不行

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板凳
发表于 2014-8-29 16:15 |显示全部帖子
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回复 荷荷 的帖子
! L: H0 i) F, i7 `) t
/ O4 J( k% _3 e; ?每次用完我都清水刷干净,然后高温高压,这样做可以吗
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报纸
发表于 2014-9-3 11:40 |显示全部帖子
回复 水念人倦 的帖子
6 N& X1 {2 P9 \- n! |/ J9 l) u; ^  p3 s4 Q
直接剪碎,第一次长出来的细胞找老师看过,是脐带间充质干细胞。一开始是有杂细胞的,那怎么才能避免杂细胞呢

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地板
发表于 2014-9-3 11:41 |显示全部帖子
回复 fuyinsheng 的帖子: l; y$ T' V7 h- X% M

- ~8 a4 C% x4 ^1 e老师,华通氏胶怎么剥离?

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7
发表于 2014-9-3 11:41 |显示全部帖子
回复 倒腾细胞 的帖子: @5 h8 l9 M3 f+ w9 \6 X- z$ E1 Y. i

7 _" T& ]' ^( h% M3 G大鼠的脐带间充质还是骨髓间充质0 Q, J& e8 W; S5 J# x

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8
发表于 2014-9-3 11:41 |显示全部帖子
回复 倒腾细胞 的帖子
" Z( k1 g* J7 A. B- H
; B* S: j1 Y% F. a; J大鼠的脐带间充质还是骨髓间充质2 w9 f- f) }: G2 \% ~, P9 H

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9
发表于 2014-9-3 11:42 |显示全部帖子
回复 colins 的帖子
$ S  _6 }3 K3 f* v* ], g
  E+ n* M, s! w: o0 j培养皿和培养瓶都是一次性的,用过就不会再用了,采用文献的方法也是无济于事啊,所以我比较头疼,不知道到底是哪里的问题

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发表于 2014-9-4 10:44 |显示全部帖子
回复 倒腾细胞 的帖子3 ]; F$ T! g9 @3 G% D' X. f! H

/ \& U" q1 e3 K" Q' w- ]那就不做脐带的了吗?这两种细胞可以通用吗
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