做过cck8的老师们能传授一些经验吗？新手初做，请多多指教，谢谢！

鹏程万里

用cck8检验细胞增殖，请各位传授一些实验中的经验，注意事项，谢谢！

452359357

云南的？

creatine

不知道你说的是不是试剂盒那种，看说明书就好了。

ytumuyangren

按照说明书做就可以，要检测的孔板中加入10ulCCK8培养箱放置4h，在450nm的波长检测就ＯＫ了！

荷荷

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; `5 [1 _3 K. L0 N) b; }; g/ V: z* h; [* w: t. {8 M" Y9 p! @
和MTT的操作方法基本一样，在合适的时间点按试剂盒说明书加入适量cck8试剂，4h后直接上机检测就可以了。

zhu1019

1.铺板均匀，细胞密度不要太大；
1 a4 O2 d4 g  Z  [2 p2.加CCK8液时不要在孔内产生气泡，否则会影响检测结果；4 N. I; \1 U# I1 _. }9 u+ A
3.设复孔，一般不少于4个复孔；

yingfeixiang

回复 荷荷 的帖子: U3 e5 u3 ]' q: ]( F; O- Q
0 Q; s4 d; J) j) H
最后计算是怎么计算

zhu1019

活率=（A加药-A空白）/（A对照-A空白）*100%0 G* r0 o* R  s' d& r$ \% J0 }
A加药：含细胞，培养基，药，cck8液
$ k/ o  Z( u; b) e( \" i$ rA对照：含细胞，培养基，cck8液（即未加药组）. y+ _( ]  r( ^) j6 b
A空白：含培养基，cck8液（若药物具有还原性，需做一个含药的空白孔，即含培养基，药物，cck8液；或者加cck8液孵育前将所有孔换下液。）

anning111

1,种细胞，别太满，否则过了OD值的阈值就不准了，一般是70%就行了，在96孔，4个复孔/ ~3 n- k3 F4 z
2，换成培养基，全部换成统一的培养基90ul，最好含FBS低，2%以下，不同的培养基会影响值，加10ul CCK-8，加时要避光，
8 T! |0 @) [1 a" Q3，37度，1.5h就行了的，时间不要太长
- S8 b# s* G3 e& l* k  l4，450nm　测OD值$ n1 W2 q" A* \! H. M0 g" a

bubble_w

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  ~! z2 \3 p6 ^
+ n& }) M: N8 U: X5 M  P# s7 j' E看你做的是什么细胞，不同的细胞CCK8孵育的时间稍有不同。我之前做的是肿瘤细胞2个小时以上就OK。你可以加入细胞之后2个小时后在避光的条件下看一下颜色，如果变色了就基本可以上机了。如果还是不确定，可以适当延长孵育的时间，建议不要超过4个小时。还有一定注意做对照组和零孔，要不数据没办法分析，实验就白做了。CCK8的实验非常好做，比MTT要简化很多，基本按照你购买的公司提供的操作说明上做就没问题。