干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 干细胞之家论坛 干细胞实验室技术交流 ips专区 关于在MEF饲养层上的小鼠iPS的RNA、DNA、蛋白提取的问题
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 40420|回复: 3
go

关于在MEF饲养层上的小鼠iPS的RNA、DNA、蛋白提取的问题 [复制链接]

Rank: 2

积分
215 
威望
215  
包包
981  

优秀会员

楼主
发表于 2014-9-14 20:52 |显示全部帖子
回复 zhd0506 的帖子# O( T6 P+ N# @% J1 j" g
4 M; v  Y' y0 V. T
我也遇到同样的问题。我的饲养层是CF-1的小鼠胎儿成纤维细胞,而iPSCs则是猪的,后期实验我要获得纯净的RNA/DNA,这样很可能会存在污染。我想过用流式先分选,然后再提RNA/DNA,但效率也不会100%,不知道还有没有其他更好的方法。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 2

积分
215 
威望
215  
包包
981  

优秀会员

沙发
发表于 2014-9-15 13:01 |显示全部帖子
回复 zhd0506 的帖子% `: M; ^5 D, k  X3 K( F& y
' f- |* I% E% ~. f, v
如果是用于后续的PCR那是没什么大问题,但我后续试验设计引物的,没有特异性区别的地方。Feeder-free的培养体系我没做过。我想向你请教一下差速的方法是具体怎么做的,可以吗?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
215 
威望
215  
包包
981  

优秀会员

藤椅
发表于 2014-9-16 14:18 |显示全部帖子
回复 zhd0506 的帖子
4 q( r9 B9 S0 N1 r- I  ]. n; c/ z3 ~5 n+ D& o9 ~7 K
就是说培养半小时后再吸取的培养基中是iPSCs了?这种分离方法最后的分离效率能达到多少呢?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 2

积分
215 
威望
215  
包包
981  

优秀会员

板凳
发表于 2014-9-18 08:02 |显示全部帖子
干细胞之家微信公众号
回复 zhd0506 的帖子
6 B8 b, o3 u' ]4 l0 R. P6 l( F+ \; p% x  i* A
好的,我试试。谢谢你!
‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-6-1 20:43

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.