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楼主: zhd0506
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关于在MEF饲养层上的小鼠iPS的RNA、DNA、蛋白提取的问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2014-9-14 20:52 |显示全部帖子
回复 zhd0506 的帖子; W7 C2 Y( V/ \9 o, b: T( O
& A" m* b; E1 A  b
我也遇到同样的问题。我的饲养层是CF-1的小鼠胎儿成纤维细胞,而iPSCs则是猪的,后期实验我要获得纯净的RNA/DNA,这样很可能会存在污染。我想过用流式先分选,然后再提RNA/DNA,但效率也不会100%,不知道还有没有其他更好的方法。
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沙发
发表于 2014-9-15 13:01 |显示全部帖子
回复 zhd0506 的帖子
! c; H. n% _/ h6 k# `: n. p8 p. g: G2 ^. l5 a$ V+ u* g
如果是用于后续的PCR那是没什么大问题,但我后续试验设计引物的,没有特异性区别的地方。Feeder-free的培养体系我没做过。我想向你请教一下差速的方法是具体怎么做的,可以吗?
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藤椅
发表于 2014-9-16 14:18 |显示全部帖子
回复 zhd0506 的帖子) T6 m' f0 H3 w+ e
6 |; E$ V1 j/ g. b& \3 @
就是说培养半小时后再吸取的培养基中是iPSCs了?这种分离方法最后的分离效率能达到多少呢?
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板凳
发表于 2014-9-18 08:02 |显示全部帖子
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回复 zhd0506 的帖子1 [: Q/ E  d7 o/ Y# ?- [0 G

* A" E5 S8 r! y7 J$ K$ T, q好的,我试试。谢谢你!
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