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[请教] 求助 DMEM/F12特别容易变黄正常吗?   [复制链接]

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楼主
发表于 2014-9-16 11:13 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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我用的DMEM/F12养细胞,以前的时候是正常的隔天换液,换液的时候也不怎么黄的,可是现在就今天换了液,明天看就已经完全黄了,感觉很不正常,我先后用了Hyclone的现成的培养液和自己配的Gibco粉末的培养液,都出现了快速变黄的情况,想知道大家的DMEM/F12也容易变黄吗?
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32楼
发表于 2014-9-30 12:01 |只看该作者
先培养箱重新校准一次试试,有没有可能是减压阀调的太高,把培养箱的电磁阀冲坏了?
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31楼
发表于 2014-9-29 18:54 |只看该作者
回复 yeshch 的帖子
" {! j: W6 S+ M2 G& H% J
) n% B$ \& i# h( y4 b8 }懂了,谢谢啊) l9 a! K7 q6 [' v( [% h) z
还想问一句就是检测是否支原体污染有没有比较省钱的办法啊?试剂盒什么的应该是不会给买的...

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30楼
发表于 2014-9-29 16:59 |只看该作者
回复 听不到 的帖子4 \7 G4 A. \2 D$ I- g$ |

1 b7 c8 c" G! z8 l一般情况下,支原体感染的细胞确实不会出现很明显的症状,这也是支原体污染广泛的原因之一。但是,支原体污染过的细胞在某些基因的表达上是会受到影响的,比如支原体可能会抑制某些基因的表达。因此,有支原体污染的细胞做出来的实验结果就会受到质疑。所以发现支原体污染后最好及时处理,扔掉或者药杀。个人经验,仅供参考
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29楼
发表于 2014-9-29 11:26 |只看该作者
回复 yeshch 的帖子
& X/ o0 K4 X6 b9 s6 p' L1 {* I  |  i, w1 W4 Y  n
之前听说支原体污染是很常见的,所以一直默认我自己的细胞是有支原体污染的...但是对细胞生长有什么影响吗?感觉好像生长的都还好...
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28楼
发表于 2014-9-29 11:25 |只看该作者
回复 hefan1234 的帖子4 d3 g5 {+ k7 O' s- R0 `
$ u; m4 G6 S( O: N3 X
赶脚我得试试支原体检测这个,但是完全不会啊...

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27楼
发表于 2014-9-26 10:57 |只看该作者
回复 听不到 的帖子
' u+ w: ~' b$ E3 }4 H) k3 F% R( t) c) O$ ~
不一定,要看养什么细胞了呀!如果养MES就是要每天换液,而且当细胞量比较大时,每天换液黄的都比较快;其他的细胞可能就慢一些。除了培养液配方不同外,很大的原因可能就是ph变了,如果细胞没有出现明显异常,问题就不大。但是,最好做一下支原体检测,我们实验室有段时间出现类似情况,结果部分细胞检测出支原体污染。
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26楼
发表于 2014-9-25 16:50 |只看该作者
DF12本身比DMEM浅,就容易变黄。变黄说明细胞液变酸。但是需要注意:1.污染,变黄而且浑浊;2.细胞密度过大;3.培养基暴露在空气中时间过长。
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25楼
发表于 2014-9-25 12:51 |只看该作者
一般来说是酚红,很早以前我们自己用粉末配培养基的话也是偏淡黄色的,加点碳酸氢钠就会变红了,但是你的排除培养基污染这方面的问题,因为污染也会导致培养基变黄,特别是支原体污染导致培养基变黄但是还是清澈的,所以不像细菌和真菌污染会浑浊那么明显。
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24楼
发表于 2014-9-25 12:01 |只看该作者
回复 hefan1234 的帖子1 C, [1 V1 w7 B0 D# F( W% C

. U* K( ~  S! z1 Q1 s6 x那就好,我特别不放心,感觉一加进去就是黄的,就特别害怕对细胞会有影响,它是ph指示剂不是酚红么?
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