KSR+2i养mESC

scottist

最近在使用KSR+2i+lif的培养液培养mESC，没加MEF，结果发现大量细胞出现分化，请教各位，这个试剂组合也也必须加入MEF么？谢谢。

小等

应该不用加MEF吧，这个不是feeder free的么

scottist

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) T+ I6 L; O- L4 G! Y$ v& L
2 j* w; S. U4 i0 N1 g是啊，大家都说不需要加MEF的，但是效果确实不好，不知啥原因，可能是细胞状态本来就不好吧。

lp0030

KSR换成血清会好，只是不知道血清是否影响你的实验

scottist

回复 lp0030 的帖子2 F& {/ G  M8 h* ?2 ~" e8 {
; E8 C$ }2 }/ A+ `
你的意思是将KSR换成血清，可以不加MEF，正常培养？

lp0030

回复 scottist 的帖子# y& W% p, M. u# }6 M- ~5 O

; J3 i7 P# e' V) ^( {是的，小鼠ES，LIF+血清+PD就可以了，chir也不用

scottist

回复 lp0030 的帖子
# R  X( P* q8 l6 J) B
9 B' N! p7 n, M+ B& m5 y" b请问血清是用的ES级别的，还是一般的Gibico的FBS就可以？

lp0030

scottist 发表于 2014-9-16 16:34
  ^' M$ f) s  E% i; `/ [5 B# r回复 lp0030 的帖子
) p! c% R+ D/ y/ q0 W0 T- T" E7 w
; q3 s7 `$ s3 r4 J% |请问血清是用的ES级别的，还是一般的Gibico的FBS就可以？

7 \0 G. ^7 g" M* `* y) V- o$ ^GIBCO一般的FBS就可以了" s! K- b  E$ O+ N3 |0 p

scottist

回复 lp0030 的帖子0 L. Z9 y* v1 ?- G" W. H( v2 U" _

+ n4 ~1 v% \. b& |. a非常感谢您的指导！

lp0030

scottist 发表于 2014-9-16 16:52
0 h, c9 s. g  y% C* F1 F/ ]回复 lp0030 的帖子) w# N+ L. S: ^6 u% R6 L
5 [  i6 F( Q5 X! e0 ]1 p
非常感谢您的指导！

) G! F2 e/ h* O' M1 }: y' \' j) k. f
看了你发的其它帖子，提一下基础培养液用DMEM就行了。另外，你的mES不知道是什么品系小鼠来源的，如果是129的话，就是血清加LIF，其它品系用LIF+血清+PD 和/或 CHIR