KSR+2i养mESC

scottist

最近在使用KSR+2i+lif的培养液培养mESC，没加MEF，结果发现大量细胞出现分化，请教各位，这个试剂组合也也必须加入MEF么？谢谢。

小等

应该不用加MEF吧，这个不是feeder free的么

scottist

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' B$ b8 {% J% X+ c) l2 o% ]! G) L) R. z/ t: V
是啊，大家都说不需要加MEF的，但是效果确实不好，不知啥原因，可能是细胞状态本来就不好吧。

lp0030

KSR换成血清会好，只是不知道血清是否影响你的实验

scottist

回复 lp0030 的帖子9 Y6 q( N# b& w! q

+ [: G2 `0 C$ F6 R; G* M" g你的意思是将KSR换成血清，可以不加MEF，正常培养？

lp0030

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8 e& u9 s& f6 O# @& y
是的，小鼠ES，LIF+血清+PD就可以了，chir也不用

scottist

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+ w% G" f" u  ]6 _1 U( G- E$ h! V1 B! S, {1 A" I, r+ f
请问血清是用的ES级别的，还是一般的Gibico的FBS就可以？

lp0030

scottist 发表于 2014-9-16 16:34
1 n/ [  ~0 Y, b' g7 ~) s7 a回复 lp0030 的帖子
* X  R& q4 m+ W2 V
0 s; }# H+ {+ y1 @! I/ E4 \& I0 l请问血清是用的ES级别的，还是一般的Gibico的FBS就可以？

6 {2 V+ n! N& P" j6 TGIBCO一般的FBS就可以了
0 [3 T/ T, ~! b4 k  O4 I# F; K

scottist

回复 lp0030 的帖子$ A: V6 Q4 o  ]
: O" U( h+ b$ F- D  Q3 ]
非常感谢您的指导！

lp0030

scottist 发表于 2014-9-16 16:52
6 t3 v+ N) y$ u: y$ e5 M$ l: j回复 lp0030 的帖子
+ e. d3 ?: i$ X/ b& N; H& W% x- m- l) ?5 T/ y: `, S
非常感谢您的指导！

  x5 ?" G& o) P1 b! z- J" n" n0 G1 J
看了你发的其它帖子，提一下基础培养液用DMEM就行了。另外，你的mES不知道是什么品系小鼠来源的，如果是129的话，就是血清加LIF，其它品系用LIF+血清+PD 和/或 CHIR