KSR+2i养mESC

scottist

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( H, q8 M* F% n, e8 i6 l9 M/ E" d您好，还想请教一下FBS是10%，还是15%？LIF是Millipore的ESG1007么？PD的浓度时1uM么？培养板铺0.1%明胶么？谢谢您了。

lp0030

scottist 发表于 2014-9-16 16:59 # a2 U* K+ D( u7 \9 ?: Z7 C( v
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您好，还想请教一下FBS是10%，还是15%？LIF是Millipore的ESG1007么？PD的浓度时1uM么？ ...

8 j" z; z7 ~# \# O10%FBS, PD可以用1um，LIF你看着买吧，应该不是只有millipore有吧，或者直接2I加血清，你试试吧，小鼠ES还是比较容易维持的

scottist

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  A( _- c2 q2 s. Q. C& @+ ]4 C0 h5 u2 @. Q% V* ^! d
明白，再次感谢！

scottist

回复 lp0030 的帖子' h& O- a* Z. J

3 }4 T: L+ k  k, T我的是E14，我主要是想无Feeder培养，但效果都不好，幸好有您的指导！感激不尽！

lp0030

scottist 发表于 2014-9-17 08:30 $ u/ D) U( i) u/ n% t4 a
回复 lp0030 的帖子1 n9 m* \$ S9 D1 @9 P2 C

4 D5 x9 \- U6 @8 `% R; |/ ]! e5 q我的是E14，我主要是想无Feeder培养，但效果都不好，幸好有您的指导！感激不尽！

( t2 i- a7 R8 |5 A: D' X  q9 G
E14比较好养的，DMEM+10%FBS， 再加LIF和PD或CHIR

scottist

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! V) u9 C8 b" X) s; f2 Y! A% N: D7 z& V4 s& p
好的，谢谢！

lchanlon

个人觉得feeder free 会有一些细胞分化的。KO-DMEM+ES quality Serum (or KSR) +LIF就可以了。

zm19900508

回复 lp0030 的帖子- W) }1 ?4 q3 u. L3 n+ W
9 m" P1 |, L# k6 Y; z, n
不是血清加lif加基础培养液就行了么？为什么要加PD呢？加PD貌似没有影响，加CH克隆会好看些

lp0030

zm19900508 发表于 2014-9-23 08:39
9 M. i6 N8 ~3 U9 d  {$ |& _/ B回复 lp0030 的帖子/ ?, b7 F: V3 t9 R" Z) F3 q
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不是血清加lif加基础培养液就行了么？为什么要加PD呢？加PD貌似没有影响，加CH克隆会好 ...

; L# O1 ?3 `3 }2 D129小鼠来源的ES细胞确实LIF加血清就可以。只是培养的细胞中分化的比例多一些，所以有些同学可能会觉得不太好。所以加点抑制剂让细胞更均一一些吧。CH和PD应该都有帮助的。

scottist

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$ H, k! p* h+ U$ L, R! R* T6 ], O
谢谢！