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请问这是干细胞吗?   [复制链接]

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楼主
发表于 2014-9-21 14:52 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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本帖最后由 cloud100 于 2014-9-21 14:54 编辑 , [$ M, ^* w, G& v
3 i5 z& H6 G  y- H/ Z( G
我之前一直用组织块发养脐带间充质干细胞,组织块贴壁都挺好,就是一直没有细胞爬出来。现在不得已,采用酶消化法。
4 ~: t* G% @6 f" [! Q1 f! F我用2型胶原酶+透明质酸酶消化 1h后,加入胰酶消化30min,之后过滤离心,得到细胞。3 L8 z0 R5 A' }3 W& L
但是细胞个头很小,密度很低,接种后大概只有6*104/ml。' _+ F3 b3 X5 ?0 l1 _
今天已经是接种后第7天,由于培养基颜色一直变化很慢,也还没换过液。细胞大概第2天就贴壁了吧,但一直是小小的圆形,没有变成梭形。* v( ]: n1 s2 D9 J! O7 |% H9 k/ J
今天拍照发现有些细胞长成这个样子了,想请教各位老师,不知是个什么情况?, h& Y8 w4 ~, d( C  P  G
我们实验室显微镜不太清楚,图片旁边的圆形小颗粒确实是之前的小细胞。而且培养液是清亮的,现在颜色偏黄,应该没有污染。9 J% l6 E! p- c% B' ]
另外,我的培养体系:15%Gibico FBS,2mm谷氨酰胺,加EGF,bFGF。
+ N" w+ w2 P9 N+ Y9 d
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沙发
发表于 2014-9-21 18:48 |只看该作者
肯定不是
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藤椅
发表于 2014-9-21 21:51 |只看该作者
文献中没有报道过有如此形态的,但是最好还是做一下最简单的判定,比如说染色和Q-PCR检测
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板凳
发表于 2014-9-21 22:37 |只看该作者
建议你去复习一下干细胞的生长特点和形态特征,或请教一下老师或养过干细胞的同学,上面的图片没有点干细胞的特征,怎么可能是干细胞呢?
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报纸
发表于 2014-9-22 08:26 |只看该作者
个人认为这是培养瓶底部的纹路,不是细胞。按照楼主描述的离心得到的细胞很小,应该是没有处理干净的红细胞,不知楼主用多大浓度的胰酶消化,消化后液体是否还是比较粘稠?如果是,那就用PBS稀释一下,加大离心力,或者增加离心时间。祝楼主实验顺利。
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地板
发表于 2014-9-22 09:03 |只看该作者
这个肯定不是的,酶消法做出来的细胞虽然暂时不是梭形,但是是贴壁的状态,我做酶消没遇到过这种情况,确实有可能是纹路
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发表于 2014-9-22 12:13 |只看该作者
应该不是,没见过张这样的。起码的贴壁梭形都看不到& y1 i9 M% h8 r, {
如楼上所言,可能是你显微镜没调好,视野不对,看到的是瓶底的纹路或# Y. N* y# v. e
瓶壁下方的什么东西
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发表于 2014-9-22 13:10 |只看该作者
没对好焦吧,看到的可能是培养瓶下的乳胶手套印的的粉。。。。。
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发表于 2014-9-22 13:22 |只看该作者
这个可以肯定不是细胞................
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发表于 2014-9-22 14:06 |只看该作者
不是吧,应该是瓶子间摩擦形成的纹理,拍的不够清晰而已。
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