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本帖最后由 cloud100 于 2014-9-21 14:54 编辑 , [$ M, ^* w, G& v
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我之前一直用组织块发养脐带间充质干细胞,组织块贴壁都挺好,就是一直没有细胞爬出来。现在不得已,采用酶消化法。
4 ~: t* G% @6 f" [! Q1 f! F我用2型胶原酶+透明质酸酶消化 1h后,加入胰酶消化30min,之后过滤离心,得到细胞。3 L8 z0 R5 A' }3 W& L
但是细胞个头很小,密度很低,接种后大概只有6*104/ml。' _+ F3 b3 X5 ?0 l1 _
今天已经是接种后第7天,由于培养基颜色一直变化很慢,也还没换过液。细胞大概第2天就贴壁了吧,但一直是小小的圆形,没有变成梭形。* v( ]: n1 s2 D9 J! O7 |% H9 k/ J
今天拍照发现有些细胞长成这个样子了,想请教各位老师,不知是个什么情况?, h& Y8 w4 ~, d( C P G
我们实验室显微镜不太清楚,图片旁边的圆形小颗粒确实是之前的小细胞。而且培养液是清亮的,现在颜色偏黄,应该没有污染。9 J% l6 E! p- c% B' ]
另外,我的培养体系:15%Gibico FBS,2mm谷氨酰胺,加EGF,bFGF。+ N" w+ w2 P9 N+ Y9 d
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