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本帖最后由 cloud100 于 2014-9-21 14:54 编辑 7 @) j$ {' q9 E! \# n1 ~& _+ o v
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我之前一直用组织块发养脐带间充质干细胞,组织块贴壁都挺好,就是一直没有细胞爬出来。现在不得已,采用酶消化法。/ @) T H: b7 N% `
我用2型胶原酶+透明质酸酶消化 1h后,加入胰酶消化30min,之后过滤离心,得到细胞。8 M$ O/ d! u: l+ ?7 Y
但是细胞个头很小,密度很低,接种后大概只有6*104/ml。9 a0 o' }4 r* d% E J
今天已经是接种后第7天,由于培养基颜色一直变化很慢,也还没换过液。细胞大概第2天就贴壁了吧,但一直是小小的圆形,没有变成梭形。0 H& ~- d7 H" v% u
今天拍照发现有些细胞长成这个样子了,想请教各位老师,不知是个什么情况?, G1 c9 o; Y- E, L
我们实验室显微镜不太清楚,图片旁边的圆形小颗粒确实是之前的小细胞。而且培养液是清亮的,现在颜色偏黄,应该没有污染。
9 e2 V7 d; M* i5 j1 ], c4 c另外,我的培养体系:15%Gibico FBS,2mm谷氨酰胺,加EGF,bFGF。
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