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请教各位大神有关间充质成骨诱导问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2014-9-24 12:58 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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最近在做脐带间充质的成骨诱导,感觉诱导开始的第5天细胞密度就有些过大了
" N  l& X, m' }: d昨天换液时,把细胞层给吹起来了....6 `$ @8 {  {$ C
( e9 F; k2 w8 {+ b3 n
请教各位大神,成骨诱导期间如何保持一定的细胞密度呢?; `7 [) l1 X2 x6 v% I$ z, ~" y
有同事说可以提高Dex的浓度抑制细胞分裂,可有这种说法?
1 ?& p/ H" Q) `* o
6 X: h- r  O$ _% b附带我的诱导培养基配方:0 ?2 F1 j+ Y2 |' B
a-MEM+10%FBS
7 U# @5 p8 a& [) b1 X6 cVc=0.2mmol/L
) D. t+ k% w# t! [b-glycerol phosphate=10mmol/L) Q" A. w- P- U/ p% t; d
Dexamethasone=0.01umol/L' ^7 r- v& l7 W+ O5 W8 N
' K  p. x9 _+ `0 [
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沙发
发表于 2014-9-25 10:03 |只看该作者
你可以考虑降低MSC接种密度,我做的时候24孔板用的细胞量不到10(4),成骨分化的时候效果还不错
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藤椅
发表于 2014-9-25 16:34 |只看该作者
回复 baby00000003 的帖子$ p, k0 z# Q8 o+ b
0 F' X+ Y  C% |' B3 x- x0 h! E
我一般是用成品诱导培养基诱导的,感觉60%融合时开始诱导比较合适。
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板凳
发表于 2014-9-29 08:42 |只看该作者
回复 荷荷 的帖子
& @6 ^9 E3 V$ j, |9 m1 `# p/ b# A: ^% i: @8 i+ m6 [- ?9 Y+ g; e4 d
俺也是60%左右开始诱导的,然后5天细胞就长满了......
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报纸
发表于 2014-9-29 10:24 |只看该作者
回复 baby00000003 的帖子
. D, ]. `9 g  @4 F- N0 [
7 D1 n9 `% q! M( ^0 X) q, A长满也没关系,换液的时候小心些还是不容易把细胞给吹起来的。我经常是最后染色的时候容易把一部分细胞吹起来。
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地板
发表于 2015-6-24 19:50 |只看该作者
本帖最后由 细胞海洋 于 2015-6-24 19:55 编辑
/ |" D, d  b. i' `" c2 k- ^8 D# v$ X& {; t; F1 n: Z: p6 f. [7 }
回复 荷荷 的帖子  s# z5 _: e2 ]
! S5 b2 f2 H  E& T
你好,请教成骨诱导培养基成品买的是什么牌子的,谢谢,
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