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请教各位大神有关间充质成骨诱导问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2014-9-24 12:58 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近在做脐带间充质的成骨诱导,感觉诱导开始的第5天细胞密度就有些过大了8 G0 G- r/ @6 }
昨天换液时,把细胞层给吹起来了....
: N- q" e5 [  K0 Y2 c
( r! \5 F- y* r" G9 N请教各位大神,成骨诱导期间如何保持一定的细胞密度呢?
2 a2 t0 m) r) Y. H; T3 @6 ?, `9 {( z有同事说可以提高Dex的浓度抑制细胞分裂,可有这种说法?( a6 Q) x- Z/ `3 {

# c  a$ C  R0 i) [9 H" i( I附带我的诱导培养基配方:
4 K: r9 F5 }* T1 \: a3 D* fa-MEM+10%FBS
/ z& Q" \. Q/ ?" KVc=0.2mmol/L
& {/ n  c# A) G/ C( Bb-glycerol phosphate=10mmol/L
2 t5 a5 r, V$ t5 @5 ~! wDexamethasone=0.01umol/L
3 s: R2 e* `3 w9 r
$ H8 w* y& r& R8 e
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沙发
发表于 2014-9-25 10:03 |只看该作者
你可以考虑降低MSC接种密度,我做的时候24孔板用的细胞量不到10(4),成骨分化的时候效果还不错
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藤椅
发表于 2014-9-25 16:34 |只看该作者
回复 baby00000003 的帖子2 j. `3 ~' \/ G' P: G, M/ W

% Q% U( F9 J$ n5 e8 d3 O我一般是用成品诱导培养基诱导的,感觉60%融合时开始诱导比较合适。
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板凳
发表于 2014-9-29 08:42 |只看该作者
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回复 荷荷 的帖子
3 |; d- @+ L6 P: V5 c- v0 x; @! ]- @% E6 i. d
俺也是60%左右开始诱导的,然后5天细胞就长满了......
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报纸
发表于 2014-9-29 10:24 |只看该作者
回复 baby00000003 的帖子
6 {6 i9 y; N! ~% q0 Y& ^
: G( V* j* ^! a- l( {: m( ?/ L长满也没关系,换液的时候小心些还是不容易把细胞给吹起来的。我经常是最后染色的时候容易把一部分细胞吹起来。
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地板
发表于 2015-6-24 19:50 |只看该作者
本帖最后由 细胞海洋 于 2015-6-24 19:55 编辑
* s) P  @* i# b* L0 g# _8 g7 M1 y  B- K4 w8 p0 w# B
回复 荷荷 的帖子
2 a, W1 `' P& x& P1 `. e4 o* v) ]0 q; |* B
你好,请教成骨诱导培养基成品买的是什么牌子的,谢谢,
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