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关于流式图的一个问题,求指点   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2014-10-14 14:04 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

+ k8 F  b$ E, g) o8 A! K$ _5 C如图所示,为什么是两坨细胞呢?
* P/ ]+ W& {4 [& k
( z, y7 u' ^7 F6 N是因为细胞周期不同的原因么,处于分裂期的细胞FSC会比较大?如果是这样的话SSC不应该是一致的吧?求大神解答。
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沙发
发表于 2014-10-14 15:34 |只看该作者
你上机的是什么细胞?是不是两种细胞呢。出于分裂期的细胞本就占所有细胞比例低,而且FSC代表体积大小,正好分裂为两个细胞同时两个细胞没有分开的情况应该很少吧,我觉得可以忽略不计。做了好多流式细胞仪检测从来没有因为这个出现两个细胞团,你这个应该是左边的团是细胞碎片的可能性更大。
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藤椅
发表于 2014-10-14 16:40 |只看该作者
FSC:细胞大小,SSC:细胞折射率
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板凳
发表于 2014-10-14 17:00 |只看该作者
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回复 sdudai 的帖子5 l( u: E  A. X
& q8 j8 w9 f% x) E) u$ C* S
非常感谢。。这个我也猜测过。。可一般碎片的FSC不会超过20万吧。。纠结。。稍后再上图。。
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报纸
发表于 2014-10-15 08:38 |只看该作者
回复 水念人倦 的帖子9 c) Z/ W+ Q' i+ @* k( \2 x9 w

/ G8 e+ r' e' J8 D2 G碎片的数量也可以很多啊,这要看你是什么细胞,怎么处理的,这种情况实际上经常会看到的。你可以做个凋亡检测下不就清楚了么。而且可以镜检看看细胞状态。
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地板
发表于 2014-10-15 08:52 |只看该作者
本帖最后由 水念人倦 于 2014-10-15 08:53 编辑
3 c: N$ }# C. A3 U" v8 s1 I( b8 ^3 k. T* W; \' J% A
镜检没问题,P2的脐带MSC,如果是碎片的话荧光强度没有这么强吧?
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发表于 2014-10-15 08:55 |只看该作者
ISO图上错了。是这个
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发表于 2014-10-15 17:26 |只看该作者
      根据FSC与SSC流式图可以清楚看到两群细胞,其中右边数量较多的一群应该是细胞生长状态比较好的细胞群;左边细胞群应该为凋亡细胞群,左边这群为状态不好的细胞群,楼主若有多余细胞可以做做凋亡检测,左边这一群细胞应该会检测出凋亡特征;楼上说的细胞碎片其实集中在图中最左下角,因为碎片的荧光值是最小的。) s4 X; T6 p# u1 S1 C
      这结果说明:1、你的细胞状态不好(因为已经有明显的细胞分群),状态好的细胞应该右边一群占80%以上;2、如果是原代取样的细胞则可能有其他细胞污染。个人倾向第一种可能,就是你的细胞状态不好,建议在取样,培养,实验过程中注意操作尽量温柔,操作不慎会直接在结果中看出来,例如细胞碎片比较多。另外如果你做的是CD44检测,在画门时应该只画右边状态好的一群细胞分析,排除死细胞,因为你的研究对象应该不会是死细胞吧?
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发表于 2014-10-15 23:35 |只看该作者
应该是状态不好导致的,出现过这样的情况,但是没有这么严重,就是状态不好,碎片意义上是左下角的细胞群
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金话筒 优秀会员

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发表于 2014-10-16 09:35 |只看该作者
以前也做过脐带间充质,我认为有可能是你操作幅度过大,对部分细胞造成伤害了,所以才分的群
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