饲养层细胞射线灭活方案？

mecol

准备用X射线灭活CF-1小鼠MEF细胞，目前从文献上查到总量是40Gy，但是不知道具体如何操作。我们医院使用的是通常肿瘤病人的放疗仪器，求教有类似经验的朋友，该如何做？譬如，细胞的处理及量，一次给与的射线量，等等
' m0 q% e  Z8 Y: \  e拜谢！

zhusealin

将细胞全部收集到50ml离心管中，30Gy辐照

scottist

X射线没听说过，Gama射线的剂量如下：如果用的是钴60，处理MEF的剂量选择20-25Gray，有的地方如复旦大学放射研究所用铯137，用的放射剂量为50Gray。MEF生长到80%-90%，就可直接辐照处理，瓶数没有严格要求，仪器中差不多能放下就可以。

xbpy

总去放射室太耽误人家工作了，请问药物处理多少时间，多大剂量好呢？

mecol

回复 scottist 的帖子( s) J) ^& ~- |* T! S

  X& e' ^+ D4 V; n$ K$ T  U能一次就使用20-25Gy的剂量吗？那细胞岂不是都放死了？能不能具体点呢？

mecol

回复 zhusealin 的帖子. |- Z% _, v, k0 I
# j- F  ]8 u2 s, u6 Y8 L/ @- k4 E
谢谢！能具体点吗？

mecol

回复 xbpy 的帖子
- C( O2 q. n" K% \
: _1 [, X+ \9 W+ w' u! M6 q收费的，但是效果很好。丝裂霉素C处理2-3h即可，工作浓度10μg/ml

shihuijunm

X射线一般是80KV，辐照30min，将整盘（10cm dish）细胞摆在X 射线辐照仪里面照就可以了，辐照结束后，消化细胞，然后冻存或者直接使用。
& J' o! d4 P% b( O! Z8 [! _0 @+ i. a: p
补充内容 (2014-10-24 14:38):1 I* y3 y4 }+ ^$ T% b" k
同济大学医学院6楼可以X射线辐照

xbpy

回复 mecol 的帖子$ i5 k; }  k7 l9 s* a. I

( k, K& m: J% ~4 G  \' E+ T多谢回复。前几天用药物处理后做了一个上清实验，看看处理后的细胞在第1~7天什么时候的上清更有助于肿瘤细胞的生长，结果基本没啥效果，还不如普通培养基呢，不知怎么回事。而且10ug/ml3小时处理后的成纤维细胞，传几次2个星期了还不死。:dizzy:

mecol

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, C9 [6 c' x) ]3 p
- X, W0 A3 A, Z一般用1周