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楼主
发表于 2014-11-6 00:29 |显示全部帖子
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本帖最后由 fenlichong 于 2014-11-6 00:31 编辑
/ ?& X. x0 \9 |8 |
' i- G- a9 x2 M& R% Z' u最好附上照片,以确定形态是否正常,有无污染等。你收获的PBMC细胞纯度如何,是否高于90%?接种密度一般1-2×106个/ml就可以,扩瓶的话试试每两天扩一次。添加因子一般还有IFN-γ,培养原理及添加因子可参考此帖http://www.stemcell8.cn/thread-70676-1-1.html。不知按照你添加的因子及培养方式操作的话,你们实验室其他人员有没有出现类似问题?
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沙发
发表于 2014-11-6 00:32 |显示全部帖子
最好附上照片,以确定形态是否正常,有无污染等。你收获的PBMC细胞纯度如何,是否高于90%?接种密度一般1-2×106个/ml就可以,扩瓶的话试试每两天扩一次。添加因子一般还有IFN-γ,培养原理及添加因子可参考此帖http://www.stemcell8.cn/thread-70676-1-1.html。不知按照你添加的因子及培养方式操作的话,你们实验室其他人员有没有出现类似问题?

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藤椅
发表于 2014-11-6 21:18 |显示全部帖子
回复 sdzhxq 的帖子" g0 K) k: ^5 L! [. f  @$ J
' d% Z: B( B5 J
PBMC的细胞纯度我也不知如何确定,个人认为应该有如下几个指标:1.离心后获得的白雾状细胞层较纯,少红细胞参杂;2.多次洗涤离心,以去除混杂的血小板等;3.种瓶后镜检观察细胞形态是否均一。
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