western 检测的蛋白表达量太少怎么办

ceshishua

一般来说western 时，总蛋白的浓度控制在1~3mg/ml，这个可以用标准蛋白加酶标仪来测。4 R; P* z4 d- V8 x) x- U
1~3mg/ml的体积是长期摸索的结果，大部分时候都是没问题的，除了少数表达量很少的目的蛋白，比如受体蛋白。另外这个浓度范围也可以保证胶孔中的样品加的不至于太满。- f4 K$ n6 g. Z% i
如果只是定性的看，也建议这样摸索一下蛋白浓度。这样一来，根据目的蛋白的表达情况去确定上样量、控制上样体积等方面都会方便一些。