脐带间充质干细胞培养

jinhaifeng

我这边养的脐带间充质干细胞细胞爬出来的速度很快，但是往后就不怎么增值，传代后也是，请教下是什么原因呢，是不是培养基不行啊

bsx1111

组织块必须贴稳，细胞才会爬出来。华通胶撕下来很容易剪的，不要剪得太小，那样组织块就会一直飘在培养液中。建议前12小时用很少的培养液，只要保证组织块没有干就可以了，比如T75的培养瓶可以只用3-4ml，组织块贴稳以后再慢慢添加培养液，每次也不要添加太多，基本原则是前一周保证组织块不干就可以，等组织块全部贴稳后可以多加培养液了。还有脐带干细胞爬出来的速度本来就不快，培养过程中尽量不要动。7天左右可见细胞迁出，10天-12天可进行传代

月_幻影

细胞爬出来的速度很快说明活力还是不错的，建议前几代传代的时候密度高一些、别太低了…

jinhaifeng

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3 L" d. ?. L3 H
  |/ g: j( [/ s3 O& Z* Y* Z/ d0 J谢谢，以前传代密度稀的时候细胞增值也挺快啊，换了家公司用了不同的培养基; ^% _( `) \; R2 {9 P& Q0 K, y5 ?

frankhu

一个看消化是否过度，另一个就是细胞是否污染。因为原代你长的很快，就很难判断培养基出了问题，除非每次都是这种情况。

zxmflying

有可能是培养条件（如培养基）不合适，或者是在培养的过程中被污染了，建议检测一下支原体。

jinhaifeng

谢谢各位高手的指教，我再看看

水念人倦

回复 jinhaifeng 的帖子7 E- r. W  V3 d2 b, W) q, t- e/ M

% A* `: V1 f: t6 a爬出的快的话，应该说明样本和培养基是没问题的，我觉得也是接种密度出了问题。楼主什么密度接种的呢？

chenchunlei

回复 jinhaifeng 的帖子- x& x0 ^4 A* Q& |# S& N
7 a! J9 L# r1 U+ d
细胞爬出来很快说明你的细胞没有问题，和你分析一样感觉培养有问题，可以换一种培养液养养试试，在一个是你的培养皿，皿不一样细胞生长状态就不一样。你也可以传代后的两到三天半量换液试试

791849046

组织块悬浮培养也可以的