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[请教] 求助,有做过羊膜上皮细胞的大神吗?求帮忙   [复制链接]

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发表于 2014-11-27 11:08 |显示全部帖子
回复 sc-cxw 的帖子' \, p/ R; C% S5 a# b, T' c1 `

  a& x+ a7 b) D1 R3 U% q. S我也不知道...就是把血丝撕下来的时候感觉也撕掉了一层什么东西...
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发表于 2014-11-28 11:06 |显示全部帖子
回复 sc-cxw 的帖子
1 G2 y1 M% N( i. U& p2 C; n( y5 m, t! O6 K: J' `' i3 }' }
我昨天听人说应该是处理干净之后是完全无血的白色的薄膜
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发表于 2014-12-9 19:40 |显示全部帖子
回复 sc-cxw 的帖子! c/ @1 B2 L* j5 I% ~% D' Y: s
& |% _) l, Y; e
我试了一下,倒是贴壁了,但是明显贴壁的不是细胞,不知道是什么东西
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发表于 2014-12-9 19:43 |显示全部帖子
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回复 coffee.cat105 的帖子
( a7 r" I3 k3 \) Q& b4 U, D( ?8 Z+ r& }9 v) g5 v. ?
啊?你这样一弄我一点信心都没了,我上次处理到最后就是超级薄的一层膜,透明的了,也消化下来了细胞,但是可能是我取到的羊膜已经结冰...的原因,还有我处理的时候已经拿到羊膜很长时间了,所以以为这些原因导致细胞死了,打算再试试的。我隔天看的时候发现贴壁了东西,但不知道是什么,明显不是细胞。初步认为是细胞碎片。打算明天再试试的,你这样一说我都不敢整了...
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发表于 2014-12-16 11:13 |显示全部帖子
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1 c6 N. u1 g  E/ ^
9 K5 r4 L% J- a" u1 X4 @, {4 P# o没权限在留言板上回复, h7 K: \/ O2 x, s/ {1 b
我成功贴壁了,但是成功的莫名其妙,我觉得是不是偶然那种...我是撕下带血丝的那层后用盖玻片轻轻刮了羊膜,刮下了一些粘液,不敢用力刮。然后0.05%胰酶37度水浴10min后过滤离心种瓶,剩下的再消化40min后过滤离心种瓶,最后是40min这个贴壁了。但我不知道能不能重复出来,所以最近打算再做一次
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发表于 2014-12-16 11:21 |显示全部帖子
回复 coffee.cat105 的帖子' p# a+ p3 n. f0 ]: H8 O
0 h- C4 H- r; Y- l3 B9 n" L
挺多的,我处理后第三天看的,基本就可以传代了那种,上皮样细胞比较多,有少量间充质样细胞,然后我现在传到了F1代,感觉明显间充质样细胞变多了,不知道培养液能不能起到选择的作用
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发表于 2014-12-16 11:22 |显示全部帖子
回复 coffee.cat105 的帖子4 i' u7 G- S- X; D

0 l$ l3 J6 i, `/ a我觉得我这次之所以能长出来也有部分原因是我取羊膜的时候是让他泡在双抗PBS里的,然后就没结冰...实在是我上次直接放在冰盒里拿回来,然后完全结冰了就,估计细胞都冻死了
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发表于 2014-12-16 12:26 |显示全部帖子
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! p) _& y2 U6 P3 h
0 [' c# \. ~8 V4 I" |我不知道...我不是临床的,是找的医生要的羊膜,他直接给我的,所以我也不知道取得是哪部分
- \/ Z+ b; ]6 M0 c! p
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发表于 2014-12-16 12:29 |显示全部帖子
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# Z& L- H. A/ y% i+ n( o- z
7 Q- h( G3 q8 [' o$ D0 a% g我拿到的挺大一部分,所以我理解的是拿的是胎盘上的,具体的我也不是很清楚,不过我是只撕下了有血的那层,我理解的是另外一面最外层就是羊膜了,羊膜上皮层不是在最外面吗?
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发表于 2014-12-16 14:23 |显示全部帖子
回复 coffee.cat105 的帖子; b1 k" ^0 ~  y7 I

6 o( i" F6 U4 u9 ~2 z% w+ i没有,就正常种瓶的
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