求助，原代分离羊膜上皮细胞不贴壁

qiaozhong.9876

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我想问一下你的是胎盘羊膜上皮细胞还是什么？你试试培养基里加20%的血清，不知道你的培养基里有没有加因子，这个很重要，我觉得你重复消化，细胞有可能死了，细胞死了也不贴壁，你做个胎盘蓝染色，看看细胞死的多不多，还有一个原因就是这个羊膜本身的问题，有的羊膜上的细胞就是不贴壁

qiaozhong.9876

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我现在一直在做胎盘羊膜上皮细胞的分离与培养，我分离的细胞基本上很少有不贴壁的，我一般胰酶消化10分钟后去掉再加胰酶消化一个小时，没有重复消化，在消化半个小时后摇一摇继续消化，我觉得是你的培养基和因子的问题，不知道你用的是什么牌子的培养基和血清，血清最重要

qiaozhong.9876

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; }+ W& {8 m% g# D. j, B' M我选取的是胎盘的胎儿面侧的那层薄羊膜进行消化的，那层细胞我们称之为胎盘亚全能干细胞，不知和你的是不是同一种细胞？我不知道你的那层羊膜状态怎么样，状态好的羊膜可以消化下好多细胞，有时候能达到10的9次方，这主要取决于羊膜的质量，这是我个人的经验，有的羊膜胶质比较多不好处理，还有就是要新鲜的羊膜，不要运输时间太长。关于你细胞传代不长，我觉得原代长的好的，传代也应该没问题，不知道你这种情况只出现一次，还是都是这种情况，如果都是这种情况那就麻烦了。

qiaozhong.9876

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