CIK细胞一夜之间灰飞烟灭，跪求解答啊。 - 免疫细胞治疗专区干细胞之家



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查看: 106462\|回复: 28	go CIK细胞一夜之间灰飞烟灭，跪求解答啊。 [复制链接]

yzy017101

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楼主

发表于 2014-12-6 18:44 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

本帖最后由 yzy017101 于 2014-12-6 18:59 编辑
5 m3 V" x' j o5 R2 [& z8 {* H; w
自体的CIK细胞培养到第三天细胞培养液40ml，细胞密度3.1X10^6/ml，总数1.2X10^8,第三天补液40ml，到第二天观察发现完全看不到细胞，镜下只能朦胧的看到杆状的小黑点，培养液变黄浑浊。怀疑染菌，但怎么一夜之间消失啊？
做了革兰氏染色图片如下：, x3 I; ^# {$ o- l' w0 J
求解啊

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沙发

发表于 2014-12-6 18:47 |只看该作者

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CELL007

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藤椅

发表于 2014-12-6 19:42 |只看该作者

污染了，细菌涨势良好，讲营养都汲取了，CIK都裂解了

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yinfuhua

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板凳

发表于 2014-12-7 00:19 |只看该作者

回复 yzy017101 的帖子/ S8 L l7 @7 G% S! B) N
/ P" `; ~) S4 y9 i" [3 ^
这是被细菌污染了。赶快弃掉吧！另外，查找一下原因并尽快进行相关处理：1、查验所用培养液、因子，做下检测看是否被细菌污染（包括耗材）；2、对CO2培养箱、超净台擦拭消毒、紫外线照射消毒；3、做下环境监测等等。再做细胞培养时从更衣开始就严格按规定的要求去做，不得马虎。

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yzy017101

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报纸

发表于 2014-12-7 08:25 |只看该作者

革兰氏染色那些图片能看的出来是阳性菌还是阴性菌吗？？

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素心无痕

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地板

发表于 2014-12-7 10:12 |只看该作者

可以肯定是细菌污染了。原因：1.培养基污染；2.孵箱污染；3.操作不规范。

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yzy017101

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7楼

发表于 2014-12-7 10:17 |只看该作者

革兰氏染色图片可以看出是阴性菌还是阳性菌吗？培养箱还有别的细胞，目前没发现污染。有没有细胞培养液革兰氏染色结果判断的标准啊

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lyj-0017

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8楼

发表于 2014-12-7 11:00 |只看该作者

回复 yzy017101 的帖子- H1 R$ W1 ^' ~
# J F& [, X, f9 E+ T
同一个培养箱别的细胞没有发生污染，说明环境没问题。如果培养基是买的商品化的产品，培养基应该问题不大，如果是自己配制的培养基，使用之前都应该用一个小瓶子装一点放培养箱里试试再用。个人怀疑最大的原因是你的个人操作的问题。