请教有关细胞冻存的问题

baby00000003

只是如果假设技术上可以实现的话，9 L" D0 {6 ^8 F
冷冻过程中如果可以持续振摇冻存管或者冷冻血袋的话，是不是可以避免因为自然沉降导致的细胞浓度不均匀呢？
1 ]5 s# o5 q, ]$ e: Q% i或者说，这种自然沉降完全没必要去刻意避免？

鬼赦秉

! Z) y8 K' B# A9 k
. t( R0 e: M& k" f  c' }) t我们做冻存的时候会考虑的是如何保证细胞的存活率，会加DMSO/FBS（1:9）。至于沉降的问题，我不知道你是有什么需要所以要防止沉降。不过我觉得，反正下次你用细胞的时候也要取出来解冻的啊，所以沉降与否都不紧要的吧。

yeshch

冻存液对细胞是有损伤的，均匀滴加后尽量不要摇晃以避免对细胞造成太大损伤

xiaolizhang87

回复 baby00000003 的帖子2 U4 R# `' m2 V; T2 m" V3 s
9 T( p2 o# P7 Y& ?! y, @
冻存细胞时，尽量将冻存液在4度预冷，然后在制成细胞悬液。使用的程序降温盒也要提前在4度预冷，然后将加入细胞悬液的冻存管转移到程序降温盒中。尽量缩短细胞降至4度及-80度的时间，也可在一定程度上避免细胞的沉降。( d3 Y" @: S0 ^5 M1 p7 t  G" j
不过感觉细胞在冻存液中的这种自然沉降也没必要刻意避免，操作时注意一下就好。

wxdang

其实细胞冻存，可以不考虑浓度问题，如果细胞在运动，理论上是否可以考虑其细胞的损伤问题，是不是得不偿失

daviddow

我们是先放在-20度1到2个小时，然后放到-80冰箱，然后液氮

bleachmen2

回复 daviddow 的帖子4 p) I! E/ X8 R$ P9 K% g

- u* B3 j, t1 E3 J( z-20℃的时候冰晶效应最强，怎么还在-20放1-2个小时呢？一般的做法都是先-80度1天再液氮吧。

naturehu

个人感觉细胞在冻存液中的沉降速度较慢，还是不要持续振荡的好，保证细胞的完整性和存活是关键。

大胖子阿哥

回复 baby00000003 的帖子  F$ J2 v/ Y# ^5 }) c5 h

" N2 a( \7 u- J* n6 t没有必要刻意去避免细胞自然沉降

sdfengxuan

细胞冻存的目的是保持细胞的活性吧，冻存过程中的因为自然沉降导致的细胞浓度不均，对活性有影响吗？