请教：干细胞分化之后的检测手段有哪些呢？

flydragon5

新手提问，请版主赐教，谢谢了

leijun

帮你找的
# F( [. X& o1 o8 k( J7 s诱导分化检测举例
3 i( W# r1 H" [) x1.向脂肪细胞诱导分化 　
: w. v: n7 d% v$ G. w1 q以每孔 2×104的密度将细胞接种在25cm×25cm塑料培养瓶和6孔板,诱导分化体系为含10%FBS、10-6mol/L地塞米松、100μg/mL 1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤(IBMX)、50μg/mL抗坏血酸的IMDM培养基。每3天半量换液1次。第14天采用油红O染色,于倒置显微镜下观察脂肪滴的形成。
. i0 {' P: R7 B; u2.向成骨细胞诱导分化 　 ' {. L/ U& ^( z# s* U1 ~% i; J4 x
细胞以每孔2×104的密度接种于25cm×25cm塑料培养瓶和6 孔板,诱导分化体系为含1.0×10-8mol/L地塞米松,2.0×10-4mol/L抗坏血酸,7.0×10-3mol/Lβ-磷酸甘油的IMDM培养基,每3天半量换液1次。第14天用Von Kossa染色检测钙化基质沉淀。

痞子的烟头

1# flydragon5

痞子的烟头

干细胞分化后检测手段，我提几个常用的* k5 ^- s0 a5 O+ S3 k' E6 t6 N
RT-PCR 7 D! D5 e. w! w0 c, U
FQ-PCR
$ P$ z* k+ A6 q. s细胞免疫组化
+ w# i- H' o7 ~, qFACS及分选. ~4 Y8 x+ m! `. z
等等) y- @" X6 f! ?: Y# z2 d$ J' j
不知你具体想从哪些方面进行检测4 c$ r  W: r' _5 h
其手段可以由自己选择比较合适的

痞子的烟头

如果有什么问题或经验
9 \9 p- L) {) s2 b6 e" V1 [我们可以交流( R* h  p. P% P- K4 y
因目前实验比较多
% x# q5 V9 p4 w2 D; v9 t' j. [: f( z所以不能及时回复，还请见谅！

flydragon5

非常感谢版主和各位朋友，受小弟一拜

痞子的烟头

不用客气，" S4 f3 u' q' A
相互交流才会进步！
9 w. ]- w  @0 v# H% r' X- D有什么问题以后我们可以随时讨论！

zhaoxiuyu1984

7# 痞子的烟头 , ~* W/ {  y4 `0 E  Z$ r
. _/ H- }5 H" v( W  g" z

6 E9 u, h8 O# u3 K6 z你好！我目前要做乳腺干细胞分化   我也不知道什么方法做好！尤其是对其标记物的确定！方法上也没做过？请问您做过乳腺的吗 ？如果没有能够给于些建议吗 谢谢了

痞子的烟头

8# zhaoxiuyu1984
. q4 J% _  z8 |* c+ R
+ S5 X+ r0 e1 l% i
8 E9 I4 B: J! N5 f% D0 r5 i不好意思，刚看到你的贴子！' A" D, t- j+ y4 {, T2 W4 h
乳腺这块我没有做过，但目前关于干细胞分化的常用的也就三种方法，! ~3 }  ?+ s" ^! g/ w. w& U
1. 细胞因子诱导，这需要你大量阅读文献，关注最新的NSC
" Q# \! e1 Z0 P$ k1 s% L9 ^2. EB8 l1 o# V" i+ k4 o' l
3. 共培养# a6 R" z/ S# q2 p
有关实验细胞或实验中遇到的问题，我可以给你点建议( o& `* i  X1 O: @9 ?: Q
但实验的具体protocol需要你自己摸索！" B3 H) @! |1 w# `8 [) {0 h" \
祝好运！

aoppolle

成体干细胞向造血细胞，神经细胞，内皮细胞分化的鉴定。我已经用过了形态学和表面标志物的检测了，还需要做一下功能鉴定。不知道该做哪些。