请教：干细胞分化之后的检测手段有哪些呢？

flydragon5

新手提问，请版主赐教，谢谢了

leijun

帮你找的" C5 Y4 p* {5 E# `
诱导分化检测举例" s" M: h8 W( r4 u$ m9 `
1.向脂肪细胞诱导分化 　2 J& k  I/ p( s8 w
以每孔 2×104的密度将细胞接种在25cm×25cm塑料培养瓶和6孔板,诱导分化体系为含10%FBS、10-6mol/L地塞米松、100μg/mL 1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤(IBMX)、50μg/mL抗坏血酸的IMDM培养基。每3天半量换液1次。第14天采用油红O染色,于倒置显微镜下观察脂肪滴的形成。
' u& O. l& t% L" E& a. t8 p* `2.向成骨细胞诱导分化 　 & @  e- E& Y' |) l' g
细胞以每孔2×104的密度接种于25cm×25cm塑料培养瓶和6 孔板,诱导分化体系为含1.0×10-8mol/L地塞米松,2.0×10-4mol/L抗坏血酸,7.0×10-3mol/Lβ-磷酸甘油的IMDM培养基,每3天半量换液1次。第14天用Von Kossa染色检测钙化基质沉淀。

痞子的烟头

1# flydragon5

痞子的烟头

干细胞分化后检测手段，我提几个常用的) A& U, O: K! @+ C+ Z
RT-PCR
+ a2 M& {6 D- k5 {/ }8 sFQ-PCR 0 k8 V2 M8 N: x- ?* N- q
细胞免疫组化0 C3 R( Y; b( U- K: k: h- U
FACS及分选
: E4 i) ^" d8 c0 c等等
- b- D$ @6 k& R# D3 R( B9 \" B不知你具体想从哪些方面进行检测' K/ C* N5 B. X5 u! Y
其手段可以由自己选择比较合适的

痞子的烟头

如果有什么问题或经验; Q* [* E5 d! A# ~* d4 ?9 f( |
我们可以交流( D# U( m: {* l) w
因目前实验比较多( s4 s' u& \4 s1 e2 ]0 ~: g
所以不能及时回复，还请见谅！

flydragon5

非常感谢版主和各位朋友，受小弟一拜

痞子的烟头

不用客气，
" D$ |3 _; t: W相互交流才会进步！% v5 C$ ?# u% E9 }6 G4 |! A/ U
有什么问题以后我们可以随时讨论！

zhaoxiuyu1984

7# 痞子的烟头
3 `  P( z, t. s* c) {0 w6 y5 S; f2 H7 H# }) a8 `! a

7 L: S/ e# P( U* B& O你好！我目前要做乳腺干细胞分化   我也不知道什么方法做好！尤其是对其标记物的确定！方法上也没做过？请问您做过乳腺的吗 ？如果没有能够给于些建议吗 谢谢了

痞子的烟头

8# zhaoxiuyu1984 : _6 v6 o' B, t, V9 {) Y
3 N$ a2 x/ k5 S$ e. b

% F  j) S) g7 ?" e) Q  |' ~不好意思，刚看到你的贴子！8 z: K0 z$ u+ @. R6 K- g
乳腺这块我没有做过，但目前关于干细胞分化的常用的也就三种方法，
! _" s: m* c# P1. 细胞因子诱导，这需要你大量阅读文献，关注最新的NSC4 I2 I$ V; {. a& G* g
2. EB; k: Z6 T( X+ k
3. 共培养% C4 {2 l8 T9 z
有关实验细胞或实验中遇到的问题，我可以给你点建议
) X0 `8 C" h! o  j但实验的具体protocol需要你自己摸索！# @6 G5 v& s$ O+ \
祝好运！

aoppolle

成体干细胞向造血细胞，神经细胞，内皮细胞分化的鉴定。我已经用过了形态学和表面标志物的检测了，还需要做一下功能鉴定。不知道该做哪些。