关于MSC的间接共培养

倒腾细胞

想做SD大鼠MSC的Transwell   各路前辈大神有做的吗 请问下板子规格的选择（不做迁移  细胞不通过 因子能过就可以） 以及接种细胞数量呀  不同文献众说纷纭都晕了

wangzhiqi86

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我做这个有些时间，具体的也记不清楚了。这个transwell确实很贵，也做过清洗再用，但是效果不好，所以后来都是当一次性用了。

倒腾细胞

回复 wangzhiqi86 的帖子* f# J, H/ e% C2 z" ?* t
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前辈 Corning的其实也可以分开用transwell吧 相当于一起买了六个transwell和1个6孔板' t' S8 F0 {+ {
我们经费有限 会重复利用
1 S' o0 ~6 ^6 C( X2 Z您们是吗  清洗真的是好麻烦 更悲剧的是清洗被污染了的

scarletkiki

我用的是MILLIPORE的hanging insert ，1umPET

倒腾细胞

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7 m) C7 P# Z0 \
2 ?% k2 v- ^) i3 P4 }  谢谢！

wangzhiqi86

面积小的话，你的接种密度可以放低一点，比如5000 cells/cm2，其实最重要的是把两种细胞的比例调整好，这个你可以从文献中找一些参考，因为不同的细胞生长速度可能不太一样。
3 L4 d5 Q- o# p4 n: |  n理论上A细胞放上面还是B细胞放上面是没有区别，但是最好还是把你要考察的细胞放在下层，因为显微镜更容易观察，上面的细胞焦距不太好对焦，而且后期的一系列处理不方面。
% t5 ^6 J8 b1 @' y个人感觉MSC贴壁后应该不会堵。

倒腾细胞

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# c- V, g- c: I) X4 i0 i4 h+ d# a. g& M前辈 我说的孔小是24孔比6孔 的那个孔小 这样面积小不利MSC生长  另外细胞A放上面细胞B放下面 和细胞B放上面细胞A放下面  说明的问题是不一样的吗？  选0.4μ的孔径 MSC贴了之后会堵吗？

wangzhiqi86

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板子的选择和孔径大小没有关系，24孔板也可以选择大孔径的，你要看看供应商的说明书，每种孔径的用途不一样，太大了细胞会迁移，细胞未贴壁之前的直径一般在10um以上

倒腾细胞

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7 Q6 l4 B% T" A* D我看的文献也是24孔  但是看到说孔太小 细胞长得不好  暂时准备的六孔

limeiying

我之前做间接共培养用的是Costar的24孔板，货号为#3470，可透，膜孔径为04um，至于接种细胞数量得根据膜面积大小及密度来确定。4 H, O* [/ ^6 H9 o4 a