关于MSC的间接共培养

倒腾细胞

想做SD大鼠MSC的Transwell   各路前辈大神有做的吗 请问下板子规格的选择（不做迁移  细胞不通过 因子能过就可以） 以及接种细胞数量呀  不同文献众说纷纭都晕了

wangzhiqi86

我以前用过，BD、Corning和Millipore都有卖的，这些都是用于间接共培。BD和Millipore的transwell是可以单个拆下来用，孔板需要自己买，而corning的transwell和孔板是一起来的。所以不如前面用起来的方便，但是效果和价格上都差不多。

倒腾细胞

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第一次做  孔径大小 孔数选择 还有细胞接种量还得摸索

limeiying

我之前做间接共培养用的是Costar的24孔板，货号为#3470，可透，膜孔径为04um，至于接种细胞数量得根据膜面积大小及密度来确定。! L7 B' V# h- z$ _

倒腾细胞

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# P$ h; N: s0 u5 o' {' g
我看的文献也是24孔  但是看到说孔太小 细胞长得不好  暂时准备的六孔

wangzhiqi86

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1 f! L7 b7 C( n/ C9 A7 u! W
" i5 P6 T5 w+ p9 ~: u4 f5 i, A板子的选择和孔径大小没有关系，24孔板也可以选择大孔径的，你要看看供应商的说明书，每种孔径的用途不一样，太大了细胞会迁移，细胞未贴壁之前的直径一般在10um以上

倒腾细胞

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  ^; R  l6 c' ?  U& T! _
4 F9 w, O9 p# V5 U! l! K前辈 我说的孔小是24孔比6孔 的那个孔小 这样面积小不利MSC生长  另外细胞A放上面细胞B放下面 和细胞B放上面细胞A放下面  说明的问题是不一样的吗？  选0.4μ的孔径 MSC贴了之后会堵吗？

wangzhiqi86

面积小的话，你的接种密度可以放低一点，比如5000 cells/cm2，其实最重要的是把两种细胞的比例调整好，这个你可以从文献中找一些参考，因为不同的细胞生长速度可能不太一样。+ R( p2 |( T6 h& d: |
理论上A细胞放上面还是B细胞放上面是没有区别，但是最好还是把你要考察的细胞放在下层，因为显微镜更容易观察，上面的细胞焦距不太好对焦，而且后期的一系列处理不方面。5 N% ^* K& c0 F9 m7 o8 T) w
个人感觉MSC贴壁后应该不会堵。

倒腾细胞

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! u2 n9 H; B/ n  谢谢！

scarletkiki

我用的是MILLIPORE的hanging insert ，1umPET