间充质干细胞计数问题

sjh15123382094

我们实验室都是采取的人工计数的方法，用移液管吹打混匀后，抽取少量，用平板计数法计数。细胞数多的时候还好，传代的时候细胞数比较少，显微镜下观察一个4X4小格一般10个细胞以内了。总觉得误差很大，请问有没有精确一点的计数方法？

williamsunny

这个是比较传统的、比较经典的、也是比较准确的方法，只是你计数的时候要加台盼蓝，只计数活细胞就好了。还有，计数的时候要快，不然细胞沉淀下来不均匀，计数就不准了

gd541767393

目前这是使用最多的人工操作方法，还有细胞计数仪。但是前提都是人工取出样本，所以只有操作规范点，尽量重悬均匀，减少误差

素心无痕

目前所使用的人工细胞计数方法属于静态，断点观察，因其成本较低得到了广泛运用。就楼主提出的问题需要解决的是一下问题：1.你需要精确的对间充质干细胞进行计数，那么首先你要确定你手上的细胞是间充质干细胞。就原代细胞的提取，或多或少都掺杂有其他骨髓细胞；2.你需要对细胞进行增殖或药物毒性试验观察，那么推荐你可以使用爱森公司的RTCA，如果如果仅仅是为了传代，就用平板计数即可，还有精确些，可以使用手持细胞计数仪。

小小龙001

人工计数时要注意染色时间，时间过长也会影响细胞活率，而且有条件的话也可以用细胞计数仪，现在我们这用的是countstar的，而且可以把人工计的数和细胞计数仪的结果综合来考虑。

sjh15123382094

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sjh15123382094

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sjh15123382094

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sjh15123382094

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alicia_86

细胞计数的准确率跟细胞量有关，过多和多少都影响准确率。再有就是细胞取样一定要混匀。最后取10微升打入计数板计数。