【成脂诱导】
1.用0.1% Gelatin将培养皿包被过夜(4度), 细胞密度接3X104/Cm2将细胞接种到相应的细胞生长培养基中,当confluence达到100%时,等2-3天吸走细胞生长培养基,换成成脂分化完全培养基。
2.3天后换成脂化完半全培养基,再过24小时后又换回到分化完全培养基。为提高分化效果,如此来回跟换培养基3次。3-5个循环之后,换成成脂分化半完全培养基继续培养7天,其中每隔3天跟换一次新鲜培养基。
3.Oil red O Stain染色:吸走培养基并用PBS 淋洗一甲醛溶液固定30分钟。
4.PBS淋洗2次后,加入Oil red O (用水按3:2稀释)。
5.PBS淋洗2-3次后,光学显微镜下观察染色结果。