请教有关DC-CIK培养，悬浮细胞和贴壁细胞的问题

baby00000003

经过ficoll分离后，使用无血清培养，2.5h后移出悬浮细胞' S. \7 V- b% I5 V
6 T( z7 C) n2 R0 Z9 f5 y
悬浮细胞使用IFN-gamma继续培养
; x! Y+ R+ q) y4 [# j; k. M+ T贴壁细胞加GM-CSF和IL-4
! W+ Z) I2 j8 ^1 W: i" e, G2 [' [) S
经过大约24小时后观察发现，移出的悬浮细胞又有一部分贴壁了，而贴壁细胞的瓶子里也有部分细胞是悬浮的! _  O. n. D9 ?7 Y& X3 M  p* d4 }
( V# U/ V: j, F4 e7 e5 t" H8 A
请问这种现象正常么？. Q5 f$ U5 i: L7 a: x5 a
如非正常，可有解决方案或者是实验中可能被忽视的关键步骤呢？
8 k# a* ~& u. m" c- s如果细胞中混有部分红细胞是否会对培养产生不好的影响？+ H% N0 N+ u; a. k$ N

& |& U2 _( t& i* K5 k1 A小可初探免疫细胞培养工艺，恳请各位老师不吝赐教，谢~

baby00000003

回复 奇幻雪蓝 的帖子7 V" K# u) k* b
1 B# e4 s" p, v0 k
第一次做，准备的不充分，当时先培养了2.5h就直接分瓶加因子了，过夜以后观察，就有如上的现象
* E+ J* H3 e7 ^' L7 \; C. z做了一份外周血、一份脐带血，体积都在120ml左右，单核细胞总数都是3*10^8
" E, g* P# c! w# j, J9 T7 F单核细胞密度3*10^6/ml,后经换液和传瓶调整到1.5*10^6/ml