继续拜托流式达人和免疫细胞资深老师帮忙看图

baby00000003

这是CIK细胞培养第13天的流式表型检测，3表示CD3，56表示CD56，iso表示同型对照，SAM表示样本
% C# [5 H* l: c! l( p想请教各位老师，4 L$ v6 R& n/ i: X" k
1，培养到这个样子就可以进行和加载TAA的DC的共培养了吧？
  R; ^" d' L% q  O7 F7 p" v2，从流式图来看，可不可以理解为“同一群细胞中有一部分CD56明显阳性，其他的CD56阳性弱或者不表达”？+ ]3 G1 F  h5 l9 L6 b- E
3，如果继续培养下去，CD56的阳性率还会继续升高么？- u: b2 \2 n. {: F$ N% Q, j; k
4，更高的CD56阳性率是不是等于更强的细胞毒性呢？
7 l7 o) {; @" M. p5 t6 n8 K

wanglinling

CD3CD56双阳的在培养14天后还会继续增高可到21天，但这段时间细胞也会逐渐衰老。

lyj-0017

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7 W+ H/ |' e) o; n5 {2 }4 y, w( @- Z
8 C+ c: p9 l  X- U, P& g# U$ K: V你说的没错，癌症病人的个体差异很大，培养出来的CIK细胞主要效应细胞比例浮动也比较大，低的有低于10%的，高的也有高于70%的，不能一概而论。

dollar007

DC可以提前冻存起，回输的时候再解冻。一般CIK活性最强的时候回输效果较好，需要细胞数和双阳的平衡。建议在14-16天的时候开始回输，这个时期细胞活性好。

baby00000003

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感谢前辈悉心教导~  W/ ^5 w) ?# Q3 |0 w5 @

! D- a( j5 f+ m1 n2 V. X! l继续请教，如果DC不能养太久，而CIK的CD56又迟迟上不去，这时候DC要如何处理呢？冻存？
0 u% w6 ]* ]6 w5 O' YDC的部分需要过流式看看比例么？+ _' C8 w0 ?8 u! N% E
比如CD83、CD86什么的......一般需要达到多少比例才算OK呢？
. }0 C9 J  R( l0 p  f1 v/ J今天把剩下继续养的CIK和DC都跑了下流式，感觉养的越久，阳性率越高呀......
2 L3 w% c( F% D6 E# C5 p  y$ w而且就取样计数来说，细胞增长速率是从D12左右开始呈现指数型增长的，是不是细胞增长速率达到峰值的时候算是细胞质量最好的时候呢？
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dollar007

回复 lzlmiranda 的帖子1 r  D4 a5 E: @/ S
+ r% C0 C) h; {7 Q+ R
公司的广告100%都有浮夸部分，可能有部分可以达到50%。我们也有部分样本可以达到60-70%，但也有10%来点的，个体差异比较大。

lzlmiranda

这是我上个月抽检的一个，算做的比较好的，25%也算基本线了吧。我曾经被上海的一家公司鄙视过，他们在实验室的数据可以达到50%以上。

lzlmiranda

回复 baby00000003 的帖子1 m2 q- g+ ?2 k) L/ G# j1 K
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打升白针是针对白细胞极度底下的患者，并不是所有人都适合。升白针有两种一种叫G-CSF，粒细胞集落刺激因子，一种叫GM-CSF，巨噬细胞粒细胞集落刺激因子，这两种从名字上看就知道主要是升粒细胞的，而不是淋巴细胞，用升白针打起来的白细胞属于幼质白细胞，很多功能都不完善，用来培养真的够呛。很多病人在化疗期间长时间使用升白针还有可能导致极大地副作用，有可能白细胞再也升不起来，我还见过打升白针打成再生障碍性贫血。8 ?/ P# z) V& E/ o
对于我们做细胞治疗的来说，升白针实在是躲得越远越好，打了升白针至少要恢复一段时间才能采血。

lzlmiranda

回复 baby00000003 的帖子- u0 }$ s" H3 `. e" X) c" H
2 ~7 S8 t9 a) h2 D% u# K/ A: @
13天的CIK算正常，养了13天的DC实在是很少见，你确定那还是DC细胞么？如果诱导PBMC不成功的话一般会出现梭形的贴壁细胞，那些大多数都是巨噬细胞了。

dollar007

回复 baby00000003 的帖子4 T6 z9 u5 a+ c
( T5 s0 Y8 O. i0 F0 W
癌症病人如果要做DC-CIK，给医生建议：对病人用增白剂（增加白细胞比例的一种药）。能不能用白介2，这个医生说了算，我们只是技术员，不是医生。