分离单核细胞时，如何吸取白膜层？

wanglinling

是用50ml离心管梯度的吗？白膜层应该是比较明显的，可以用1ml枪头触及分离液与上层交接处的白膜层直接吸，一般7ml左右可以完全吸干净。如果没有明显的白膜层考虑1，单核细胞数量偏少。2，梯度的时候操作不当导致分界层模糊。3，降速太快扰乱了本来界限清楚的白膜层。

wanglinling

如果是上面的某种原因导致的可以改善的方法：1，梯度液应在室温18-25°使用。2，铺梯度的时候尽量放液慢，可以倾斜离心管。3，离心结束的降速调低。

wanglinling

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6 `7 L% z" C, o( Q6 T
那你应该观察一下刚铺好梯度的时候分层是否明显，可以看出你铺的好不好

wanglinling

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! z6 `% V4 S! J' Z5 ?5 D6 q去血浆是什么意思？怎么去的哦？

wanglinling

回复 lxy07 的帖子6 f3 \) @2 ]; B6 j% B) E4 M

- d6 J+ n" X' w你是白膜层一点都看不到还是只是细胞少而已

wanglinling

回复 lxy07 的帖子% h3 w$ x# p2 T6 v

, T+ R+ _6 S, s那还是梯度没有弄好，换一种分离液试试吧，不知道你们用的哪种？