分离单核细胞时，如何吸取白膜层？

wanglinling

是用50ml离心管梯度的吗？白膜层应该是比较明显的，可以用1ml枪头触及分离液与上层交接处的白膜层直接吸，一般7ml左右可以完全吸干净。如果没有明显的白膜层考虑1，单核细胞数量偏少。2，梯度的时候操作不当导致分界层模糊。3，降速太快扰乱了本来界限清楚的白膜层。

wanglinling

如果是上面的某种原因导致的可以改善的方法：1，梯度液应在室温18-25°使用。2，铺梯度的时候尽量放液慢，可以倾斜离心管。3，离心结束的降速调低。

wanglinling

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' j+ m. L! |( t( k" ^5 E那你应该观察一下刚铺好梯度的时候分层是否明显，可以看出你铺的好不好

wanglinling

回复 lxy07 的帖子, p0 |2 S& a' M( v; G3 l. }' u

6 ^  w9 E' ?2 Z. b5 A% j去血浆是什么意思？怎么去的哦？

wanglinling

回复 lxy07 的帖子9 x) T% [* s- Z/ e9 S) ]% I- ~

$ Z3 g: d$ I6 G你是白膜层一点都看不到还是只是细胞少而已

wanglinling

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$ Z2 k4 F3 K4 a* Y% a0 P" B$ D4 n& o9 v" P+ K) S
那还是梯度没有弄好，换一种分离液试试吧，不知道你们用的哪种？