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分离单核细胞时,如何吸取白膜层?   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2015-3-10 16:06 |显示全部帖子
是用50ml离心管梯度的吗?白膜层应该是比较明显的,可以用1ml枪头触及分离液与上层交接处的白膜层直接吸,一般7ml左右可以完全吸干净。如果没有明显的白膜层考虑1,单核细胞数量偏少。2,梯度的时候操作不当导致分界层模糊。3,降速太快扰乱了本来界限清楚的白膜层。
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沙发
发表于 2015-3-10 16:10 |显示全部帖子
如果是上面的某种原因导致的可以改善的方法:1,梯度液应在室温18-25°使用。2,铺梯度的时候尽量放液慢,可以倾斜离心管。3,离心结束的降速调低。
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藤椅
发表于 2015-3-10 16:24 |显示全部帖子
回复 lxy07 的帖子
( t$ d$ j6 B8 S2 O2 d5 |
' j+ m. L! |( t( k" ^5 E那你应该观察一下刚铺好梯度的时候分层是否明显,可以看出你铺的好不好
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板凳
发表于 2015-3-13 16:05 |显示全部帖子
干细胞之家微信公众号
回复 lxy07 的帖子, p0 |2 S& a' M( v; G3 l. }' u

6 ^  w9 E' ?2 Z. b5 A% j去血浆是什么意思?怎么去的哦?

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报纸
发表于 2015-3-13 16:33 |显示全部帖子
回复 lxy07 的帖子9 x) T% [* s- Z/ e9 S) ]% I- ~

$ Z3 g: d$ I6 G你是白膜层一点都看不到还是只是细胞少而已
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地板
发表于 2015-3-17 16:43 |显示全部帖子
回复 lxy07 的帖子
$ Z2 k4 F3 K4 a* Y% a0 P" B$ D4 n& o9 v" P+ K) S
那还是梯度没有弄好,换一种分离液试试吧,不知道你们用的哪种?
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