分离单核细胞时，如何吸取白膜层？ - 淋巴细胞生成专区干细胞之家

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查看: 184034\|回复: 5	go 分离单核细胞时，如何吸取白膜层？ [复制链接]

wanglinling

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楼主

发表于 2015-3-10 16:06 |显示全部帖子

是用50ml离心管梯度的吗？白膜层应该是比较明显的，可以用1ml枪头触及分离液与上层交接处的白膜层直接吸，一般7ml左右可以完全吸干净。如果没有明显的白膜层考虑1，单核细胞数量偏少。2，梯度的时候操作不当导致分界层模糊。3，降速太快扰乱了本来界限清楚的白膜层。

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wanglinling

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沙发

发表于 2015-3-10 16:10 |显示全部帖子

如果是上面的某种原因导致的可以改善的方法：1，梯度液应在室温18-25°使用。2，铺梯度的时候尽量放液慢，可以倾斜离心管。3，离心结束的降速调低。

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藤椅

发表于 2015-3-10 16:24 |显示全部帖子

回复 lxy07 的帖子

那你应该观察一下刚铺好梯度的时候分层是否明显，可以看出你铺的好不好

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板凳

发表于 2015-3-13 16:05 |显示全部帖子

回复 lxy07 的帖子7 R" a8 ]" C+ V5 ^% E0 \" j

去血浆是什么意思？怎么去的哦？

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wanglinling

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报纸

发表于 2015-3-13 16:33 |显示全部帖子

回复 lxy07 的帖子7 J& {3 i$ |/ f/ a$ ~7 t
A% W+ ?$ c/ @1 g4 Q- ^; H
你是白膜层一点都看不到还是只是细胞少而已

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wanglinling

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地板

发表于 2015-3-17 16:43 |显示全部帖子

回复 lxy07 的帖子
' B6 C/ k0 J+ V# i
那还是梯度没有弄好，换一种分离液试试吧，不知道你们用的哪种？

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