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干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 干细胞之家论坛 免疫细胞治疗专区 【求助】脐带血样NK细胞体外培养使用培养基的一些问题
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【求助】脐带血样NK细胞体外培养使用培养基的一些问题 [复制链接]

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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2015-3-26 07:58 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
目前我正在准备做NK细胞的细胞治疗探索实验,想问一下,如果我用的样本是脐带血样本的话,相比外周血有何不同?另外选用培养基的话,是否考虑用无血清培养基培养?请有这方面经验的朋友告知!谢谢!
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沙发
发表于 2015-3-26 08:16 |只看该作者
你怎么啥都做啊?

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藤椅
发表于 2015-3-26 08:36 |只看该作者
我只做过脐血来源的NK,用的是几种细胞因子的组合,效果不理想,扩增率还可以,但CD3阳性值太高,CD56+阳性值升不上来。不知楼主是不是用饲养层细胞培养NK的方法?
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金话筒 优秀会员

板凳
发表于 2015-3-26 11:29 |只看该作者
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本帖最后由 细胞海洋 于 2015-3-27 10:20 编辑 0 W1 N0 Y) `- C6 I- B

$ Z, k6 G7 |( A: j回复 gengtongyu521 的帖子: O4 B0 I+ H' }' e
3 b9 o: u+ ~0 _$ x$ g; ~; U8 r
你能把详细的步骤跟我说一下吗?或者有你做NK细胞试验流程的doc之类的我想参考一下。我现在正在设计实验。打算用比较简单传统的方法扩增。IL-2 IL-5细胞因子 你做完了cd3的阳性率有多高?cd16这个指标你不做吗?可以交流一下
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报纸
发表于 2015-3-28 14:55 |只看该作者
回复 nailute1985 的帖子+ e( Z1 H* \/ D; j; o

' A  l6 V' l4 F+ F# CCD3大概85%以上,CD16阳性1%,极低,我用的传统的方法。
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地板
发表于 2015-4-2 13:05 |只看该作者
用IL-12比较好。
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发表于 2015-4-15 13:32 |只看该作者
脐血里面的NK细胞要比外周血高10%左右,最好是选择无血清培养液,NK细胞对血清的要求要比普通的淋巴细胞要高
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发表于 2015-5-5 16:06 |只看该作者
受教了

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发表于 2015-9-13 14:46 |只看该作者
NK不是CD3是阴性,你都那么高,不会养着CIK了吧,我买人家因子,CD5670%以上。
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