细胞消化和冻存

倒腾细胞

大家消化细胞后都会离心重悬吗？有时偷懒直接把胰酶吸走就加完全培养基重悬分装了，所以EDTA对细胞的伤害还是会大于离心吗？
& {2 Q" p* w1 u( j5 Q5 U刚开始做不久，还没有冻存经验，有前辈用赛业的冻存液吗？效果如何？

rosexinqin

我在美国的时候养HEK cells的时候可以不用离心，细胞长的Okay！但根据我的经验，养原代细胞或者Stem cells, 因为细胞很娇气，最好重悬后离心，去掉上清中的EDTA。

scarletkiki

一般都是加等量或大于胰酶的培养基重悬细胞，有时会洗两次后再冻存

aochongyu

直接吸走胰酶也会带走一些细胞吧，使用这种直接加培养基方法主要还是看细胞生长状态吧，要是前几代这样做感觉对传代有一定影响；冻存液根据细胞种类我们一般是自己配，做预实验，没用过这个牌子。

月_幻影

胰酶消化后直接加入培养基终止是可以的，我们有时传代时就是直接用培养基终止消化然后传代继续培养、、、、

791849046

传代时，离心后没有重悬过，没有影响；冻存也是这样的，感觉没有影响。

倒腾细胞

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  J+ ?! I8 z1 D, w$ M2 x2 w! a1 t
多谢前辈！

倒腾细胞

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( P4 C" p* |/ q% b* I* _, W& K有道理

倒腾细胞

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那以后原代就不偷懒了 传代想偷懒还得看细胞状态

倒腾细胞

回复 aochongyu 的帖子4 X3 i8 M+ h% I9 s- S4 R
& T+ n7 Q8 j5 U2 ~
这个牌子的推广说的是比程序冻存盒还方便高效（不会涉及到异丙醇） 只要细胞状态OK  复苏率可达90%以上