细胞消化和冻存

倒腾细胞

大家消化细胞后都会离心重悬吗？有时偷懒直接把胰酶吸走就加完全培养基重悬分装了，所以EDTA对细胞的伤害还是会大于离心吗？1 h0 t+ e/ E8 _( b8 ?; W
刚开始做不久，还没有冻存经验，有前辈用赛业的冻存液吗？效果如何？

rosexinqin

我在美国的时候养HEK cells的时候可以不用离心，细胞长的Okay！但根据我的经验，养原代细胞或者Stem cells, 因为细胞很娇气，最好重悬后离心，去掉上清中的EDTA。

scarletkiki

一般都是加等量或大于胰酶的培养基重悬细胞，有时会洗两次后再冻存

aochongyu

直接吸走胰酶也会带走一些细胞吧，使用这种直接加培养基方法主要还是看细胞生长状态吧，要是前几代这样做感觉对传代有一定影响；冻存液根据细胞种类我们一般是自己配，做预实验，没用过这个牌子。

月_幻影

胰酶消化后直接加入培养基终止是可以的，我们有时传代时就是直接用培养基终止消化然后传代继续培养、、、、

791849046

传代时，离心后没有重悬过，没有影响；冻存也是这样的，感觉没有影响。

倒腾细胞

回复 rosexinqin 的帖子+ |+ a6 @/ r( r- q3 ~7 ^
2 I" s' E. I. C7 ]
多谢前辈！

倒腾细胞

回复 aochongyu 的帖子6 }1 c$ L- ?/ V

$ a2 ?5 k; F( N1 j' C, X6 I有道理

倒腾细胞

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/ {* q  m4 T7 q$ J' F那以后原代就不偷懒了 传代想偷懒还得看细胞状态

倒腾细胞

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% G' @% R7 N- H0 u这个牌子的推广说的是比程序冻存盒还方便高效（不会涉及到异丙醇） 只要细胞状态OK  复苏率可达90%以上