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目前细胞示踪技术主要有病学示踪和非病理学示踪。: C! p* g- o# E3 C3 I$ \ [
病理学示踪技术需在移植后的一定时间内处死实验动物,心肌切片后进行免疫荧光或免疫组化分析。
Z" h1 C+ K- ]/ \. W a: P9 q标记方法主要有以下几类:
' ^( D3 K0 N F8 x/ P5 D2 [" e6 R7 B(1)荧光染料标记:
9 Y- i, b4 r. k4 a$ G. c常用的主要有烟酸己可碱(Hoechst)、1, 1′-双十八烷-3, 3, 3′, 3′-四甲基-吲哚-羧花青-高氯酸盐(Dil)、二脒基苯基吲哚(DAPI)、PKH67和PKH26等荧光色素,细胞移植前用荧光素进行预先标记,移植后可以利用荧光显微镜观察荧光标记干细胞的存活和迁移情况。
0 x0 A; ~, ?% L3 ?3 ?(2)核酸标记:2 T8 T! o& {' i1 {3 n8 J
5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-BrdU)、氚胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)能竞争性地参与细胞DNA合成,从而达到标记分裂细胞的目的。# W t# `1 y. }. d; j% e" a; f
(3) 基因标记:6 E6 a& |/ R- o3 x- X5 Q
改变细胞基因,使其表达特异性的标志物:如绿色荧光蛋白(GFP)、β-半乳糖苷酶(LacZ)。
0 i" {6 l: c- l! i* [(4)选用雄性供体和雌性宿主,利用Y染色体作为标志物。
: t7 l- l2 J+ ]8 y/ _! s: d7 T+ n) \+ k( g1 c) }3 G2 U, N
非病理学示踪技术主要应用于活体,主要是无创性影像学技术,包括直接标记示踪(磁共振显像和放射性核素显像)和报告基因显像。
% x7 l) i& \2 b2 b; o* ?* S磁共振显像技术中比较成熟的是超顺磁性氧化铁的应用,如Feridex和Resovist,而标记心脏治疗细胞的放射性核素有111铟(111In)、锝依莎美肟(99mTc-HMPAO)、18氟-脱氧葡萄糖(18F-FDG)等,
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忘了在哪篇文章看的了,希望对你有用 |
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