用什么牌子的淋巴分离液分离脐血单个核细胞？

小梓莜

大家好！最近在分离脐带血中的单个核细胞，方法为：淋巴分离液：脐带血=1:2，2000rpm，30min.离心后发现有很多红细胞存在在白膜层，不知该如何解决，是分离液的关系？还是要提高离心力？再或者是延长离心时间？希望各位大侠帮忙指导，谢谢

小梓莜

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您好！谢谢你的建议，我也听说GE淋巴分离液效果好，以后试试，想问下您那边做脐血单个核细胞分离，脐血一般存放多长时间，15h吗，或是更短？谢谢指教！

小梓莜

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& D: @4 w) `7 _
; x8 k0 B, r( T您好！谢谢这么详细的讲解，我讲讲我们这边的情况：
, d1 n5 i" g3 v1 x4 r6 D: n1、离心机是热电牌子的，升9降3，曾经试过升9降0，感觉没啥太大差别: i$ e& y1 R* w& W1 q
2、因为我做的是脐带血，时间一般都超过12h才能开始分离，最好的时候也要15h了，所以血液放置太久了) v. s5 E* r& g
3、用50ml离心管，15ml的淋巴细胞分离液，加30ml血液，每次分离结果白膜层中都会有红细胞参在其中，只多不少。

小梓莜

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+ h* i7 n6 G8 ~! G1 G2 C  ^想问下你那边脐带血一般放置多久进行分离？分离的效果如何，单个核细胞数目多少？谢谢参与讨论~

小梓莜

回复 hk456 的帖子+ [  k% e9 u/ _: o8 Y8 A1 ^* @) ?. \
9 W& x! b+ D$ K( C5 M- r
谢谢回复~~

小梓莜

回复 chenlin080102 的帖子: N3 K: w1 b: h
2 P* ]7 `9 `  T
您好！我目前离心效果好了点，留在白膜层中的红细胞减少了很多，剩下部分会再用红细胞裂解液裂解，不知您那边是如何优化的呢？改变离心转速？还是延长离心时间？谢谢您的指教。

小梓莜

回复 chenlin080102 的帖子  f- U" z$ E$ X7 @; }

5 e6 n' n* i/ H$ S3 {# f& s3 A好的，谢谢您的指导，我去查查~

小梓莜

回复 dchingb 的帖子
- m/ ~. Z5 u$ q( W
' K- j% F$ P8 r% p0 c你好！我有用PBS等比稀释，分离液为1.077g/ml。

小梓莜

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; u9 U3 R* U/ W; W! \9 W, a/ C' P, O5 n1 _0 a
谢谢，我再优化条件试试~

小梓莜

回复 chenlin080102 的帖子7 Y+ v5 U% v) e! z
1 u# U* \3 q$ g- g" Z; p
谢谢，我再优化条件试试~