关于脐带间充质培养的问题

hwlightning

最近处理了一份15cm长脐带，剔除羊膜、静动脉后，用眼科剪剪成很小很小一块，用组织块贴壁法做了10皿，培养箱倒置了2个小时后，加入3ml培养液。期间一直没管，第三天观察，组织块变得很肿大，而且有的已经飘起来了，不管了，添加5ml培养液，再过3天，组织块飘了一大半，也没看见细胞爬出来。又过了3天，把飘起来的组织和培养液都去掉，重新加入10ml培养液，到现在12天了，都还没看见细胞爬出来，各位帮我看看是哪里出了问题了？？？？
4 O9 ]  y+ x+ [$ ]% Z( ^我分析了下，一个是组织块没有贴壁贴牢，二是培养液的更换时间问题。9 N( w- Z' ^: b# z9 A3 |
给位同仁帮我看看到底是什么问题？

hwlightning

回复 20084720113 的帖子
3 g5 K# I' q* F5 @1 e
5 k, ~# ?4 l( u7 x( o. T' ]& \不加任何东西就24H静置？我是用的9cm的皿，应为是做临床我是用的商品化的培养基。

hwlightning

回复 小小龙001 的帖子7 B1 P) n9 c1 A

' v- }, F5 A+ v# K7 m& F我制备完我都不会动，三天后才会拿出来看看。可就是贴不住

hwlightning

回复 deshenglll 的帖子
" N9 J$ C( L& g. W
) f. r: O- g% u) L# W你们一根15cm脐带可以做几个90cm培养皿（或者t75培养瓶）？做开始的培养基加几毫升？

hwlightning

回复 大少爷 的帖子
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( c5 m: w+ H4 {. F+ }" e大少，那个接种到T75培养瓶怎么做才能摆好，剪好的组织匀浆很难分成一块一块,还有不好粘液和气泡。! I! p% I6 k9 X3 ~# b; }6 F$ B
还有个问题，不是所有组织块都能爬出细胞，有的组织块爬的快，有的慢，这样就只能根据爬的快的去传代培养吧！！！