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楼主: cinderella颖
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SD大鼠间充质干细胞做免疫荧光的相关问题   [复制链接]

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楼主
发表于 2015-5-19 12:08 |显示全部帖子
回复 cinderella颖 的帖子7 S9 j3 y2 m+ O, i
! R' S; L* s* z$ n5 C4 V3 }
如果从骨髓里面冲出来的MSC要做表面抗原鉴定比较麻烦
/ k. J4 g& ]5 M& ]( j给你提供一点知识
+ L4 A) W9 |6 {4 m/ I: N+ HCD106 CD166 CD29和CD44阳
- ?2 [$ ~0 ^/ W" V& e  mCD34 CD14 和 CD45 阴基本可以判断是MSC( ?4 k  e  w! v6 K  f* k$ g7 ~  z
倒不如做个分化实验来鉴定 比如做诱导分化来以分化能来判断, d2 _% a! i+ e: H
低分文章要求不高! O8 E6 O2 F$ m, p3 n% i, L
如果真的嫌麻烦
7 d" X( s( a8 @, n- @交给你个必杀 就是买9 s# A3 z% j6 i* R) z% u  |% n
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沙发
发表于 2015-5-21 15:21 |显示全部帖子
回复 cinderella颖 的帖子' v8 [  \& h1 M$ r. |4 n# H& [

2 R. E5 m5 s/ u: F) Q细胞定量问题没有遇到过
' I/ y7 r; ^5 s* j! d$ B请问下 您是想做绝对定量还是相对定量呢?
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藤椅
发表于 2015-5-22 11:58 |显示全部帖子
回复 cinderella颖 的帖子+ ?$ x, i' C/ q; F0 d/ S, F+ j
# s) \& M- S3 B. q9 ?
能否回答我一些问题8 Z8 F" T3 }3 k9 B9 ~& t9 o
1,你的MSC是从哪里取?2 j; n+ T$ ]" W. Q
2,你定量是定MSC的哪里的量?(比如在骨髓中的量or提取细胞培养后的定量)% K  G' W% h+ B+ k. R5 j
3, 别怪我多嘴,你确定了量之后,后续实验有什么想法么。(如牵扯隐私可不必回答)
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板凳
发表于 2015-5-22 11:59 |显示全部帖子
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回复 倒腾细胞 的帖子; }' q; P' Q4 c. x
  C+ Q# U, K; ?
不好意思 现在无法回答你这个问题
8 w. U1 a% H2 O; ?6 e5 [因为我也不是做定量的
7 T1 r2 h" D$ L6 R) [等我查查文献在回答你好么?

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报纸
发表于 2015-5-22 12:45 |显示全部帖子
回复 倒腾细胞 的帖子
6 g  i$ u; g& b& U- ^" e# U# d: f) H, o! p+ d6 h; I+ r) }
to 倒腾细胞, o% @4 m5 f; d4 j; o
cc 灰姑娘颖! D" |4 p( t  R! \

' }" f! k+ b( i/ }2 N不好意思 我可能表达有问题
7 X( w) m* t. A! f6 t我是想问下 你是要定量所测细胞中MSC的量
, b1 ?- Q1 I4 w$ b还是想要进行MSC和HSC量的比较(假设在骨髓)
/ {6 Y" d2 H3 d+ H8 m8 m! `现在用的比较多的方法是细胞流式很不错0 k3 v7 h6 s3 N! r, l1 d
我稍微查了下 附件有个文献可以参考下
% P2 ^( c3 n5 R/ P
" N% g3 [2 H+ U' _0 h, V# x灰姑娘
+ ~  A* i8 q0 j/ o! m! t* [* h+ J; A$ d  c4 m5 }* y: J1 h
你做免疫荧光染色是为了做个查MSC做半定量实验么?
6 z) n4 m- f" F9 T; _: q! X$ P1 Z当然如果有文献支持的话 也是可以的 * r5 Q; ~" @6 Y% x  B
方法还是跟着文献来好一点 有根据
3 A3 n' F. Y2 Z0 \* ^容易被编辑和审稿人接受6 P% ~3 C$ A7 \* f. s
* _6 s6 @% @: h% q
如有问题欢迎讨论0 Y1 k! i7 N5 i( r* }9 V9 o
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地板
发表于 2015-5-26 10:57 |显示全部帖子
回复 cinderella颖 的帖子4 J( R* u9 O/ v7 w! u8 a

/ O0 u3 Y) _" \# }; I7 P& A* u怎么说呢 / O+ u6 V' |0 W4 h
如果有仪器的话 # z% Z6 K% E6 B) T) P! U
当然做流式是最好的
7 x7 `  i3 m  x( n: t$ {/ c/ y. ^没有的话 + J' X+ S( W4 X0 u: L9 X
也只能做免疫荧光了! v; G' n! x: u6 I, B+ ~9 C3 R
毕竟染色不是一个定量的方法2 c0 a: e( K# w' w, N9 {' x
我们lab一直对于染色后的定量作为一个没有办法的办法
: Z+ b' M' k1 z8 H当然如果写论文的话 6 l* d" s4 k6 a' X' Z/ k+ _; {
最好能找到免疫荧光做定量的引用文献比较妥当。8 R% S. K4 S7 j
根据实验室的情况吧
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发表于 2015-5-26 15:02 |显示全部帖子
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; v9 Q8 l, u8 ?3 f+ f
, F# F# ]& n4 ~9 F+ Z: r# W不客气。
. j. l, |, A7 P8 j" R6 E. X: O这个我无法回答你。/ e0 r2 B4 J* D( ?6 K
参考datasheet吧。- `& Z+ {$ T& Y# |
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