大家冻间充质干细胞的时候冻存液比例是多少啊？

听不到

回复 yinchong42 的帖子' V7 W' o6 p4 E  u/ o* A9 h

  P$ v' T3 @$ u好的，我试试，谢谢啊~以后可不敢用PBS复苏离心了...

yinchong42

回复 听不到 的帖子6 R8 s4 n4 @- ]" A* i: I( I
) H. V& W+ @7 s, @. L" x1 K
四季青的就行，你要是想图便宜就用免疫组化的山羊血清，想再便宜点就买100+的马血清，反正又不是养细胞，维持住渗透压就行

yinchong42

回复 听不到 的帖子& |& W) I( A6 U, Z( q/ F- F/ G
+ G" J+ R3 X& U/ Q7 b+ ~2 N0 d% f( H
至少我在复苏细胞的时候经验是，刚刚复苏时培养基渗透压越高越好，所以血清要多，如果你的细胞比较容易死，那么就在复苏时直接把冻存液加到大量（至少10ml）的高血清培养基里，不需要离心，先养到贴壁了再换液

听不到

回复 suning5 的帖子, `7 m/ k9 ~& I7 V' N

7 J, }1 A7 b+ t) c现在血清贵的不要不要的啊，gibco不是10K+才500ml么...

听不到

回复 维维睡啦 的帖子9 P/ a. ?+ O' x& h2 n. H# r
& `: U& K# K% q2 L" a' Q
恩，想问下你知道为啥不放双抗吗？查了下没查到...有人说没影响有人说最好别放...但是具体为啥不放也不知道

听不到

回复 fm100200 的帖子
5 ?* c, @$ a; U0 Y7 m
: L- Q/ J% k2 \! W: `不用血清吗？能行吗？你冻的是啥细胞？

听不到

回复 yinchong42 的帖子& }' z, b+ [1 P- q4 j
$ j( L0 J: C. a& a% z9 J2 b4 y
恩?复苏细胞死的不是因为没冻好吗?一直以为复苏在培养液里是为了平衡渗透压,所以用的PBS...难道是这里的问题？

听不到

回复 yahooyeah 的帖子
% ?3 k: N) \% y7 h+ W% k8 p
( ^- e: j4 C( y: ?8 `恩,我打算提高下血清浓度了

suning5

血清贵毛？均分至每管，花不了多少钱。血清最好达到终体积一半

维维睡啦

你的FBS量太少，想省钱的建议用DMEM：FBS：DMSO=5:4:1的，这个比例还是比较好的，用的也比较多。培养基别加双抗的好，可以适当提高一下冻存密度。