新手养人胚胎干细胞，问题多多，求大神们解答~

Jiangshi90

XIE冬D 发表于 2015-5-4 10:49
# Z$ u' D! ^/ b  D) p- I6 {我们是最近开始养人得胚胎干细胞，上手也去别的实验室学习交流过，但是自己养得时候问题就出现 。# n( U9 X$ g6 O& z9 E9 E# X/ c: C, m) W
1.细胞什 ...

) I0 O0 C% R2 J2 \+ |0 f
细胞汇合度达到80%以上就可以传代了
& V/ v3 `, X& l* H3 e& c传代时采用EDTA消化，有些克隆贴在壁上吹不下来的话，说明消化时间不够长，用适度的力度仍然吹不下来的话就直接舍弃吧，不然吹下来也活不了- b& i" U( t% I( ]2 e, P
传代的话没有必要离心，吹走EDTA后，用培养基把细胞吹下来后直接接种即可
" y0 r2 y" I& Q0 u冻存后再复苏对细胞伤害很大，因此一是慢冻速融，二是细胞数量要足够多，三是细胞状态要好。