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楼主: 小跑
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脐血培养的CIK到第七八天就长不扩增了     [复制链接]

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9楼
发表于 2015-5-18 10:08 |只看该作者
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( G( ^4 p# {  w' X. R8 Z4 d$ s- k8 g9 Z+ _4 b6 c( g( \
用的是TAKARA的551,培养基没问题。而且培养外周血也没问题。

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优秀会员 帅哥研究员 金话筒 小小研究员

8楼
发表于 2015-5-13 14:38 |只看该作者
培养流程感觉没问题,初始培养数量你们有计算吗?少的话不利于培养,初始数量建议在0.1*10^8以上。你的细胞培养我感觉有下面几个小问题:  y) c  U2 T1 e" S! V
1、脐血量太少,所提的细胞数肯定也少,基数少,不利于细胞的扩增。
9 N; G. }, y! h2、血与抗凝剂比例,抗凝剂有点多。会影响细胞分离。5 F. W2 ]- k! Y- y0 [" I  \! P
3、如果是免疫细胞培养,抗凝剂建议用肝素类抗凝剂,在提单个核时对细胞影响小。
3 H) @5 U8 @0 @; E- ]5 D# z4 a
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7楼
发表于 2015-5-12 18:36 |只看该作者
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* h3 W7 ~9 g% j$ q1 r$ L% }5 {) k' ?
因为采血对象多为肿瘤患者,外周血分离的单核细胞活性不如脐血分离的单核细胞。如果外周血分离长得很好的话,培养液或者流程是没有问题的,那就只有考虑脐血的量和培养过程的控制。一个是脐血最好能达到50ml以上,再就是加液可以改成隔天一加,根据培养液的颜色变化来考虑是否加液。cik是一种聚集生长的细胞,量太少还一直加液的话可能是导致后期不再生长的原因。
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金话筒 优秀会员 美女研究员 积极份子

地板
发表于 2015-5-12 17:35 |只看该作者
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+ G; c+ V  m5 @  B, O8 D& \9 ~( g. N% W% Z5 a! D4 p! o
我只遇到过脐血一开始就不长的情况,一开始培养就不怎么增殖,有时培养五份,只有一份能长,但是一般长起来的后期也很好啊,要不长的前期就不长了。你再试试吧。
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报纸
发表于 2015-5-12 13:45 |只看该作者
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7 \+ C. U# y7 t- T- l; X2 h
# s- y3 }; p1 B4 G/ I! p' f5 V/ p1 R外周血来源的养的怎么样?用的一样的培养液吗?脐血来源的应该比外周血来源好养,长得也应该快!
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板凳
发表于 2015-5-12 11:09 |只看该作者
培养基问题。国产培养基有个通病,批次间不稳定。
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藤椅
发表于 2015-5-12 10:17 |只看该作者
回复 奇幻雪蓝 的帖子
) G4 `9 k3 [7 h4 N) R3 G" U9 F5 `0 y! S5 X# H) P
图忘了拍下来,跟平时培养的外周血没什么区别,第一天第二天细胞贴壁,第三天成悬浮的细胞集落,脐血在刚开始的五六天状态是很好的,甚至比外周血还好,一天补一次培养基。但是到第七八天开始,细胞就不怎么扩增了。补加细胞因子也不再增殖。
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沙发
发表于 2015-5-12 09:45 |只看该作者
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