CIK培养如何快速增殖

h951595223

CIK细胞培养，我们实验室是做自体CIK细胞培养，由于血都是来自肿瘤病人，个体差异比较大，细胞的增殖速度都不一样，隔一天增殖50%-100%之间，当遇到增殖在50%的时候会非常麻烦，培养的周期很长，患者各种不满，在这想问问大神们，如何增加增值的速度，加什么因子，怎么加，操作流程是什么，我们实验室流程为：分离淋巴细胞，10的六次方密度接种，当天加入r干扰素，第二天加入CD3100ng/ml和白介素21000U/ml,之后隔一天补一次液，一直到量够。

Natalie

要看情况补液，不能每一次都是隔一天补液，或者第二天适当补加点因子

315997864

1，可以试试提前包被用剂量的CD28一起进行包被。2。分血时血浆留着灭活后按10%比例添加。3。前面补液可以一天一补，后面看细胞密度最好调整到2天补一次。

chslyx

加点灭活的自体血清，还要看看你的因子是哪里的，厂家不一样效果差很远的

御剑红尘

细胞在分离出来的前几天别动，静置培养就可以，然后低速离心一次，细胞就会长得比较快。这是我们这里的流程。

312473313

我们一般是用CD3和IL-1a包被，IL-2直接加培养基里，第一天就加IFN-y了，细胞种瓶密度一般都大于2X10^6，后面不也根据细胞生长状况以及培养瓶中培养基颜色变化才补，可以参考下

cheeray

初期提高密度。。等大量增值后在补液。。

long3390hai

补液要看细胞密度，维持在1.0E+06/ML左右，还要看细胞的状态，有一些细胞增殖能力很低，那就无能为力了。- L& c6 H+ @# F

bukuro

9 b5 P! {2 U* n6 b$ s5 C* U8 x8 z. b, H- Y" i
最简单的方法是换培养基，最麻烦的方法是自己去试验各个组分。

老姜

给患者回输的细胞不主张向研究一样加各种因子对细胞进行刺激。这样的操作先要考虑添液环节：添液一定是在对光看培养液中有大量的颗粒（即，细胞增殖形成细胞球）才能添液。添液时将细胞球轻轻吹散，添液量一般不超过原液的1倍。这样可使细胞在培养液中保持一定的浓度，才能增殖更佳。细胞浓度太低细胞是无法到期增殖到所需数量的。