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原代养4天就传代   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2015-5-30 18:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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可是消化不顺利 很多没消下来 部分细胞甚至缩都不缩 3 A3 J; {4 B  B/ x
胰酶之前用着都还好啊  r: `! x- z& p
不会是细胞在加油长加油贴壁吧
6 d5 M6 l9 n3 T2 F前辈们怎么看?
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沙发
发表于 2015-5-30 22:13 |只看该作者
消化不好的话,先看看你的胰酶是不是在4度放的时间太长了影响消化效果。如果胰酶没问题,那你的细胞是不是除了MSC之外其他的杂细胞太多了?
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藤椅
发表于 2015-6-1 11:41 |只看该作者
是培养的什么细胞呢?

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板凳
发表于 2015-6-1 11:49 |只看该作者
血清没有洗干净吗?按照平时的时间消化不行的话,就放培养箱半分钟吧。这样也下不来的细胞八成是杂细胞或老化摊开了的细胞吧
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报纸
发表于 2015-6-2 14:39 |只看该作者
回复 daviddow 的帖子; K) D/ j2 S* J- z
4 B, J+ O# X& T+ S' I4 W
前辈 是MSC  
' J  [2 M7 ]/ u$ h- ]- B# m今天消化 换了胰酶 感觉要好些了 但是很多细胞仍旧小不下来 我估计也就下不来了 不知道那是什么情况
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地板
发表于 2015-6-2 14:41 |只看该作者
回复 夜光猫 的帖子4 x; _) B: j; m& @$ a
, Q( }& b* q4 [) ]4 G% [9 f
哦?杂细胞也会贴的那么紧吗?但是看形态就是MSC 就是下不来
, r  v# l4 Q  i8 b( y0 S3 @另外老化摊开的细胞都会缩的 然后下来
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7楼
发表于 2015-6-2 14:43 |只看该作者
回复 夜光猫 的帖子" E; s  a& @& Q: C  a; P6 f. ?8 W) X
# J/ }/ o) \$ n4 Q2 R
前辈 你们会用老化摊开的细胞做后续实验么  
: l" j- F/ o' @7 q师兄师姐说对细胞不要太高要求 客观条件有限 大概还是能用
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8楼
发表于 2015-6-2 15:20 |只看该作者
胰酶时间长,失效
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9楼
发表于 2015-6-4 09:15 |只看该作者
回复 倒腾细胞 的帖子
& ~- N. P2 q, @% S' F6 ]/ c
) j7 ^1 H" D1 {/ V& }MSC应该很好消化啊,不该难消化。是不是你分离的时候掺杂了其他的细胞?如果这样,那些细胞是不用考虑的
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10楼
发表于 2015-6-4 10:52 |只看该作者
原代细胞的消化本身就比后面细胞传代时消化时间长一些,LZ加入胰酶后可以镜下观察消化情况,必要时可以拍打下培养瓶,根据镜下观察的情况终止消化就好。
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